动物性食品中大观霉素、林可霉素多残留的测定

2022-11-16 17:58:50 月旭科技（上海）股份有限公司

1、适用范围

本标准规定了动物性食品中大观霉素、林可霉素残留量检测的气相色谱-质谱法（GC-MS）（本实验样品为猪肉）。

参考标准：《GB 29685-2013 食品安全国家标准动物性食品中林可霉素、克林霉素和大观霉素多残留的测定气相色谱-质谱法》

2、提取步骤

准确称取5g试样（精确至0.01g）于50 mL离心管中，加入提取液10mL，涡旋混匀5min，以5000r/min离心3min，取上清液于50 mL离心管中，重复提取一次，合并提取液。加入3%三氟乙酸溶液5mL，混匀，再用2mol/L氢氧化钾调节pH至5.8±0.2，加十二烷基磺酸钠溶液2mL，涡旋混匀，以8000r/min离心3min，取上清液备用。

3、净化步骤

SPE柱：月旭Welchrom® BRP小柱，规格：60mg/3mL。

活化平衡：3mL甲醇，3mL水，3mL十二烷基磺酸钠缓冲液；

上样：将备用液全部上样，弃去；

淋洗：3mL水+3mL水，弃去并压干；

洗脱：4mL甲醇，收集并压干。

4、色谱条件

4.1 气相色谱条件

色谱柱	WM-5MS ,30m×0.25mm×0.25μm
进样口温度	280℃
升温程序	150℃，保持2min，以20℃/min升温至 300℃，保持10min
载气	高纯氦气（纯度>99.999%）
进样方式	不分流进样
恒流模式	1mL/min
进样量	1μL

4.2 质谱条件

电离方式	电子轰击电离源（EI）
电离能量	70eV
传输线温度	280℃
离子源温度	230℃
四极杆温度	150℃
监测方式	大观霉素：145/171/187/201 林可霉素：126/127/73
溶剂延迟	8min

5、色谱图或者加标回收率结果

图1. 大观霉素、林可霉素0.1μg/mL图谱

表1、出峰情况

峰号	保留时间	类型	峰宽	面积	开始时间	结束时间
大观霉素	8.979	M	0.021	15336	8.957	8.995
林可霉素	12.26	M	0.031	641950	12.217	12.314

图2. 猪肉样品图谱

图3.猪肉样品加标0.01mg/kg图谱

表2、加标回收率表

物质	加标水平	平均回收率	RSD值（n=2）
大观霉素	0.01mg/kg	92.48%	3.74%
林可霉素	0.01mg/kg	78.15%	3.16%

6、相关产品信息

货号	名称	规格
00522- 20009	SPE小柱	Welchrom® BRP, 60mg/ 3mL,50pk
00824- 31001	固相萃取装置	Welch 固相萃取装置， 12位方缸
00821- 32291	盖子+垫片	Welchrom® 预切口红色特氟龙/ 白色硅胶隔垫， 9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔 6mm 100pk
00821- 40927	样品瓶	Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk
03904- 22001	气相色谱柱	WM-5MS ， 30m×0.25mm×0.25μm
00837- 05006	50mL 螺口尖底离心管	Welchrom® 离心管一次性离心管，平盖，锥形底， RCF12000xg,袋装, 未灭菌，50mL，50/包
00826- S334P250	壮观霉素二盐酸盐五水水合物/ 大观霉素标准品	A2S, CAS No.: 22189-32-8,250mg
00826- L051P250	林可霉素盐酸盐水合物标准品	A2S, CAS No.: 7179-49-9,250mg