应用速递：GC/MS测定一次性系统可提取物中的挥发/半挥发组分

2021-12-23 17:25:34 默克生命科学

浸出物存在于最终原料药和药品中，通常包含在可提取物内，但由于浸出物的量极小以及分离和检测方法的限制，很难被定量或定性。应先获得最差条件下的可提取物数据，将其用于药品的安全性评估。可提取物反映了浸出物的最大可能，无论是否要做浸出物试验，可提取物的测试和评估都非常重要。

根据 BPOG（BioPhorum Operations Group）指南和 USP<665>生产用塑料组件系统指南（草案版），应使用各种溶剂和提取时间进行可提取物的考察，并使用合适的分析方法进行分析。如果用于制造一次性系统的聚合物材料的确切成分未知，未知物鉴定至关重要。

为了加快鉴定速度，我们推出了E&L筛查用标准物质，其中包含分别适用于LC和GC检测的常见组分。使用这些标准物质，不仅可以对未知物进行鉴定，而且定量结果可以追溯至NIST标准参考物质。

以下应用是关于GC/MS测定可提取物，目的是鉴定和定量过滤器研究中存在的主要可提取物。

根据BPOG协议，使用Supelco^® SLB^®-5ms 气相毛细管柱进行实验。在40℃下用注射用水在轨道旋转提取7天后采集代表性样品，并使用二氯甲烷作为萃取溶剂通过液-液提取 (LLE) 进一步处理，并使用三联苯-d14作为液液提取内标。分析前加入菲-d10作为样品内标强化样品，样品和标准品在一个序列中运行。

表1. 实验条件

仪器

Agilent^® HP7890, QTOF 7200

色谱柱

SLB^®-5ms, 30m x 0.25mm, df=0.25 µm (28471-U)

柱升温程序

50℃保持3min, 10℃/min 升温至320℃，保持15min

进样口温度

280℃

载气

氦气, 1.2mL/min

检测器

MSD, full scan, m/z 25-800, 传输线温度250℃, EI源

离子源温度230℃, 电子能量：70eV

进样

1µL, 脉冲不分流：350kPa, 0.5min, 1:25

衬管

4mm内径进样口衬管, 分流, 锥形, 带玻璃棉, 去活

样品

1. 用于GC分析的14种E&L筛查混标, 50 mg/L溶于叔丁基甲基醚

2. 注射用水过滤提取一天

图1 14种GC可提取物和浸出物筛查混标色谱图，

50mg/L溶于叔丁基甲基醚

（出峰顺序及化合物名称见表2）

表2. 峰表

Peak	Name	CAS	货号
1	1,3-二叔丁基苯(DBB)	1014-60-4	96659
2	ε-己内酰胺(CAP)	105-60-2	01483
3	2,6-二叔丁基苯酚	128-39-2	96852
4	2,4-二叔丁基苯酚	96-76-4	00437
5	二丁基羟基甲苯(BHT)	128-37-0	47168
6	棕榈酸	57-10-3	76119
7	2-巯基苯并噻唑(2-MBT)	149-30-4	96051
8	硬脂酸(SA)	57-11-4	85679
9	双酚A(BPA)	80-05-7	42088
10	油酸酰胺(Ole)	301-02-0	08393
11	邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)	117-81-7	67261
12	芥酸酰胺(Eruca)	112-84-5	01374
13	抗氧剂168 氧化物(Irgafos168-oxide)	95906-11-9	96839
14	抗氧剂1076(Irganox1076)	2082-79-3	00318

图2 一次性设备提取物样品

GC可提取物和浸出物筛查混标的色谱图如图1所示，14种可提取物标准物质都被检测到并且几乎完全分离。质谱检测的共流出组分可以通过提取离子流色谱图来识别。通过匹配保留时间和m/z比，ε-己内酰胺被确定为一次性过滤器提取过程中的主要可提取物(图2)。可以基于筛查混标的提取离子流色谱图对己内酰胺峰进行定量分析。

本实验使用相关产品

描述	货号
GC可提取物和浸出物筛查混标	01829
GC色谱柱 SLB®-5ms, 30 m x 0.25 mm, df = 0.25 µm	28471-U
SupraSolv®二氯甲烷，用于GC ECD/FID	1.06054

除上述实验中提到的14种GC可提取物和浸出物筛查混标外，我们还可以提供LC筛查混标和其他E&L单标，具体见表3。

表3. LC筛查混标及其他E&L单标

	名称	CAS	货号
混标	LC的可萃取物和可浸出物筛查混标	50 μg/mL 溶于乙腈	95636
混标包含的各单标组分	抗氧剂1010 (Irganox1010)	6683-19-8	96656
	抗氧剂1076 (Irganox1076)	2082-79-3	00318
	紫外线吸收剂 UV-P (Dometrizol (Dome)	2440-22-4	96697
	ε-己内酰胺(CAP)	105-60-2	01483
	二苄胺(DBA)	103-49-1	95728
	苯甲酸(BA)	65-85-0	12353
	2-巯基苯并噻唑(2-MBT)	149-30-4	96051
	双酚A(BPA)	80-05-7	42088
	2-乙基己酸(EHA)	149-57-5	02529
	双(4-氯苯基)砜(CPS)	80-07-9	96153
	3,5-二叔丁基-4-羟基苄醇(DBOHP)	88-26-6	96857
	二丁基羟基甲苯(BHT)	128-37-0	47168
	1,3-二叔丁基苯(DBB)	1014-60-4	96659
	油酸酰胺(Ole)	301-02-0	96709
	硬脂酸(SA)	57-11-4	85679
	双(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(DEHP)	117-81-7	67261
	芥酸酰胺(Eruca)	112-84-5	01374
	抗氧剂3114(Irganox3114)	27676-62-6	96737
	抗氧剂168 氧化物(Irgafos168-oxide)	95906-11-9	96839
	2,4-二叔丁基苯酚	96-76-4	00437
	棕榈酸	57-10-3	76119
其他单标	二苯甲酮	119-61-9	PHR1204
	双(2,4-二叔丁基苯基)磷酸酯	69284-93-1	90048
	1-癸烯	872-05-9	78270
	3,3''-硫代二丙酸双十二烷酯	123-28-4	78132
	抗氧剂(Irganox 1098)杂质	82304-66-3	78478
	正二十二烷	629-97-0	78290
	正二十烷	112-95-8	78292
	4-乙氧基苯甲酸乙酯	23676-09-7	78699
	乙二醇单丁基醚	111-76-2	78263
	十六烷	544-76-3	78293
	异佛尔酮	78-59-1	78345
	异戊酸	503-74-2	78266
	十八烷	593-45-3	78294
	1-十八烯	112-88-9	78295
	1-辛烯	111-66-0	78340
	双酚F二缩水甘油醚(BPFE)	2095-03-6	96142