流式应用 | T 细胞活化分期的临床应用

2024-07-09 10:11:30, 安捷伦细胞分析安捷伦细胞分析事业部（BioTek）

T 淋巴细胞活化是免疫应答的核心，细胞活化伴随着其表面标记物表达的改变，根据细胞活化发生的时间可将活化标记物可分为早期标记物 CD69、中期标志物 CD25 和晚期标志物 HLA-DR。T 细胞活化检测在临床中具有重要的应用，尤其是在评估免疫应答、监测免疫疾病和评估免疫治疗效果方面，接下来让我们一起来看看吧。

免疫细胞亚群	结果	临床意义
CD3+T细胞	↑	提示细胞免疫功能增强，常见于免疫亢进状态，如再生障碍性贫血，慢性活动性肝炎，传染性单核细胞增多症，自身免疫病，重症肌无力等
CD3+T细胞	↓	提示细胞免疫功能下降，如病毒感染，免疫缺陷病，应用免疫抑制剂，淋巴造血系统肿瘤，恶性肿瘤等
CD4+Th 细胞	↑	提示较强的细胞免疫反应，如器官移植排斥反应，自身免疫病，细菌感染等
CD4+Th 细胞	↓	提示机体免疫功能处于低下状态，如亚健康、感冒，恶性肿瘤，病毒感染，原发性免疫缺陷病，慢性活动性肝炎，自身免疫病、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎等，以及应用免疫抑制剂等
CD8+Tc 细胞	↑	自身免疫性疾病（如 SLE 等），慢性活动性肝炎，结核，病毒感染（EBV，CMV、HBV 感染等），胞内菌、真菌感染，寄生虫，器官移植排斥反应，恶性肿瘤早期升高，中晚期降低
CD8+Tc 细胞	↓	细菌感染，变应性鼻炎，干燥症等
Th/Tc 比值	↑	免疫功能处于“过度活跃”状态，见于 RA、SLE、多发性硬化、I 型糖尿病等自身免疫病，以及器官移植排斥反应等
Th/Tc 比值	↓	免疫功能处于“免疫抑制”状态，多见于艾滋病、AA、某些白血病、传染性单核细胞增多症、免疫缺陷综合征、某些病毒感染、恶性肿瘤、结核病等
CD69+ 早期活化 T 细胞	↑	常见于多种自身免疫性疾病（如 RA、自身免疫性甲状腺疾病）、牙周病、系统性硬化症、病毒感染等多种感染性疾病、肿瘤及肿瘤免疫治疗等；活化 T 细胞是 T 细胞激活以及免疫系统激活类型的药物药效和安全性的指标，肿瘤患者免疫治疗后 CD4+CD69+ 和CD8+CD69+ 增加；ICIs 治疗发生 irAE 时，外周血活化的 CD8+CD69+T 细胞比例升高
CD25+ 中期活化 T 细胞	↑	常见于多种自身免疫性疾病（如 RA、硬皮病、葡萄膜炎等），多种皮肤病（如银屑病和特应性皮炎），感染、结核病、多种淋巴瘤（如 T 细胞白血病和霍奇金淋巴瘤），同种异体排斥反应和移植物抗宿主反应等；肿瘤患者免疫治疗后 CD4+T 和 CD8+T 细胞活化指标增高
HLA-DR+晚期活化 T 细胞	↑	升高提示体内免疫应答增强，见常见于于病原微生物感染以及其他一些诱因导致的免疫功能被激发的情况，如自身免疫病（血清阴性多关节炎和青少年慢性病关节炎）；病毒感染；霍奇金淋巴瘤患者外周血中 CD4+HLA-DR+ 和 CD8+HLA-DR+T 细胞百分比显著增加

CD69 早期活化

在 TCR/CD3 结合、激活细胞因子和多克隆、有丝分裂刺激后， CD69 在 T 淋巴细胞表面迅速表达。激活后早期(30-60 分钟)检测 CD69 基因的转录表达;CD69 蛋白在刺激后 2~3h 就能检测到表达。CD69 在活化细胞的质膜上出现的速度比 CD25 快，这是它被广泛用作淋巴细胞活化的早期标记物的原因^[1]。

CD69 在几种人类慢性炎症的炎症部位的浸润白细胞上表达，例如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、系统性硬化症、过敏性哮喘和特应性皮炎^[2]。在抗肿瘤免疫中，CD69 已知在肺癌患者 TME 的 CD8 T 细胞中高表达^[3]，也有研究表明 CD69 缺乏和抗 CD69 抗体的使用都会减少t细胞衰竭并增强抗肿瘤免疫反应^[4]。

图片引自引文4

图片引自引文5

CD25 中期活化

CD25 是目前公认的淋巴细胞中期活化的表面标记，在静息的淋巴细胞表面表达很少，淋巴细胞一旦被激活，CD25 即在 CD69 表达之后发生显著上调。有研究发现与移植前相比，发生急性排斥反应时CD4+CD25+ 和 CD8+CD25+ 表达增加，CD4+CD25+ 有帮助区分环孢菌素 CyA 患者发生肾毒性排斥或 CMV 感染(CMV 感染，CD25 升高)。

HLA-DR 晚期活化

HLA-DR 是免疫反应中重要的参与者，起抗原呈递的作用，HLA-DR 是淋巴细胞激活的晚期标志。辅助免疫检查点抑制剂治疗常常诱导 T 细胞的活化和增殖，以 HLA‑DR、CD38 和 Ki‑67 表达增高为特征。T 细胞活化增殖程度往往与疗效和预后呈正相关。且治疗中 T 细胞特别是 CD4+T 细胞出现显著活化（CD38+ 或 HLA‑DR+）的患者，出现免疫相关不良反应的可能性高。在 HIV 感染过程中 HLA－DR＋、CD38+ 在 CD4+、CD8+T 淋巴细胞上的表达均显著增加，反应 T 淋巴细胞异常激活；尤其是 CD8+CD38＋细胞百分比随着疾病进展逐渐升高预示疾病进展程度。

检测方案及示例：

项目	FITC	PE	PerCP-Cyanine5.5	APC	PE-Cyanine7	APC-Cyanine7
T细胞活化分期	CD3	CD69	CD4	CD8	CD25	HLA-DR

此文仅供科普，对患者的临床诊治应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况综合考虑

引文：

[1] Gonzalez-Amaro, R., Cortes, J. R., Sanchez-Madrid, F. and Martin, P., Is CD69 an effective brake to control inflammatory diseases? Trends Mol. Med. 2013. 19: 625–632.

[2] Cibrián, D. and Sánchez-Madrid, F. (2017), CD69: from activation marker to metabolic gatekeeper. Eur. J. Immunol., 47: 946-953. https://doi.org/10.1002/eji.201646837

[3] Simoni, Y., Becht, E., Fehlings, M. et al. 2018. Bystander CD8(+) T cells are abundant and phenotypically distinct in human tumour infiltrates. Nature 557:575.

[4] Ryo Koyama-Nasu, Yangsong Wang, Ichita Hasegawa, Yukihiro Endo, Toshinori Nakayama, Motoko Y Kimura, The cellular and molecular basis of CD69 function in anti-tumor immunity, International Immunology, Volume 34, Issue 11, November 2022, Pages 555–561, https://doi.org/10.1093/intimm/dxac024

[5] Li Y, Gu Y, Yang P, Wang Y, Yu X, Li Y, Jin Z, Xu L. CD69 is a Promising Immunotherapy and Prognosis Prediction Target in Cancer. Immunotargets Ther. 2024 Jan 9;13:1-14. doi: 10.2147/ITT.S439969. PMID: 38223406; PMCID: PMC10787557.

关于安捷伦细胞分析安捷伦细胞分析平台包括xCELLigence RTCA实时细胞分析仪、Novocyte系列流式细胞仪、Seahorse能量代谢分析仪以及Synergy系列微孔板检测仪和Cytation 系列（共聚焦）细胞成像多功能微孔板检测仪。安捷伦细胞分析平台聚焦基础科研与细胞与基因治疗产品的开发全流程，作为适配新一代疗法的强大分析工具，提供多方位的细胞效力检测和深度的细胞分析，并致力于研发、生产质控以及临床的全方位检测与分析方案开发。