特色方案｜缬沙坦胶囊中13种亚硝胺杂质的测定

本研究建立了缬沙坦胶囊中13种亚硝胺杂质的测定方法。采用岛津基毒专用柱ShimNex S-GTIs进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。结果显示，13种亚硝胺杂质峰型良好，且NDPA和NDIPA、NDBA和NDIBA、NDMA和DMF的分离度均达到1.5以上。该方法可为缬沙坦胶囊中13种亚硝胺杂质的测定提供参考。

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Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；

色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）；

Ghost Trap鬼峰捕集柱（柱芯：P/N 228-59921-91；柱套：P/N 380-01259-99）

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；

LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

分别准确称取13种亚硝胺杂质对照品适量，加水溶解并稀释至1000 μg/mL，得到各杂质的单标溶液；分别取各杂质单标溶液适量，加水制成1 ng/mL的13种亚硝胺杂质混标溶液，备用。

精密称取适量缬沙坦胶囊内容物，置于离心管中，加入1.6 mL甲醇，涡旋使溶解，超声10 min，加6.4 mL水，涡旋混匀，超声10 min，6000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，作为供试品溶液。最终浓度以 API 计为 10 mg/mL。

精密称取适量样品，置于离心管中，加入含量为0.1 mg/kg的13种亚硝胺类物质混合对照品溶液，加入1.6 mL甲醇，涡旋使溶解，超声10 min，加6.4 mL水，涡旋混匀，超声10 min，6000 r/min离心5min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，作为供试品加标溶液。最终浓度以 API 计为 10 mg/mL。

UHPLC条件

色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）

流  速：0.8mL/min

进样量：10 μL

柱  温：60 ℃

切阀程序：0 min（MS）→ 17.6 min（废液）→ 18.4 min（MS）

流动相：A：0.1%甲酸水

B：0.1%甲酸甲醇

梯度程序如下：

质谱条件

离子化模式：APCI，正离子扫描

扫描模式：多反应监测 (MRM)

碰撞气：氩气

接口电压：4.5 kV

雾化气：氮气 3 L/min

干燥气：氮气 5 L/min

接口温度：350℃

DL温度：150 ℃

加热模块温度：200 ℃

各化合物MRM参数见下表

缬沙坦胶囊供试品溶液、13种亚硝胺杂质混合对照品溶液色谱图如下：

为了避免高浓度的缬沙坦成品药物进入质谱，造成污染，实验中通过调整液相洗脱程序，实现13种亚硝胺杂质与缬沙坦药物进行分离，通过二位流通阀，17.6~18.4 min出峰时间内切入废液，18.4~30 min切回质谱，进行质谱监控，由于不同色谱系统的延迟体积的差异，13种亚硝胺杂质与缬沙坦的保留时间会发生变化，建议配置紫外检测器进行色谱图的监控。

本研究建立了缬沙坦胶囊中13种亚硝胺杂质的测定方法。采用岛津基毒专用柱ShimNex S-GTIs进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。结果显示，13种亚硝胺杂质峰型良好，且NDPA和NDIPA、NDBA和NDIBA、NDMA和DMF的分离度均达到1.5以上。该方法可为缬沙坦胶囊中13种亚硝胺杂质的测定提供参考。