排除基质干扰｜特殊医学用途婴儿配方食品中维生素B6的测定(GB 5009.154-2023)

1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）；

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+60L水箱+取水器）

SHIMSEN Disc 尼龙双膜针头过滤器（P/N：380-00326）；

LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet 移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（ P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（ P/N：380-00751-06）。

1.2 混合标准工作溶液的制备

分别准确称取盐酸吡哆醛、盐酸吡哆醇、盐酸吡哆胺标准品适量，加 0.1 mol/L 盐酸溶液配制成每 1mL 含 1mg 的溶液作为标准储备液；分别取吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺标准储备液适量，加流动相 A 制成每 1mL 分别含吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺 20μg 的混合标准中间溶液；取维生素 B6 混合标准中间溶液适量，加水制成每 1mL 分别含吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺40ng 的混合标准工作溶液。

1.3 试样溶液的制备

称取试样 2g（精确至 0.01g）于150mL 锥形瓶中。加入 25mL 45℃的水，混匀。静置 10min，冷却至室温。用0.1mol/L 盐酸溶液调节上述试样溶液的pH至1.76，放置1min。再用0.1mol/L 氢氧化钠溶液调节试样溶液的 pH 至4.42。把上述锥形瓶放入超声波振荡器中，超声振荡约10min。将试样溶液转移至 50 mL容量瓶中，用水冲洗锥形瓶。洗液合并于 50mL容量瓶中，用水稀释至50mL。另取 50mL锥形瓶，上面放入漏斗和滤纸，把稀释后的试样溶液倒入其中，自然过滤。滤液再经 0.45μm微孔滤膜过滤后转移1mL至棕色进样瓶作为试样待测液。

1.4 分析条件

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）

柱温：30 ℃

检测波长：激发波长 293 nm，发射波长395nm

流速：1.0mL/min

进样量：20µL

流动相：A：庚烷磺酸钠与三乙胺混合溶液：称取庚烷磺酸钠 2.0 g，用 950 mL 水溶解， 准确加入 4.0 mL 三乙胺，用冰乙酸调pH至 3.07，然后转移至1000mL容量瓶中，并以超纯水稀释至刻度，经 0.45 μm微孔滤膜过滤。

B：甲醇

梯度程序如下：