技术分享 | 抗初老成分“玻色因”的定性定量分析！

2023-12-11 15:02:00, 化妆品研发服务部 1有限公司

玻色因（Pro-Xylane）是欧*雅集团自主研发的化妆品原料商品名，其活性成分化学名为羟丙基四氢吡喃三醇，目前国内化妆品原料界将羟丙基四氢吡喃三醇等同称作玻色因。

玻色因能够修复皮肤屏障，促进胶原蛋白再生，增加皮肤弹性和紧致度，从而具有抗衰作用，因此受到了化妆品生产企业和爱美人士的广泛关注。

2019年专利到期后，国内市场上如雨后春笋般出现了众多的玻色因产品。由于缺乏行业标准，玻色因产品良莠不齐，其含量差异从30 %到90 %以上，外观颜色从无色到橙黄色不等，产品优劣难分，极易出现假货，进而引发化妆品安全事件。玻色因是欧*雅的专利产品，市场上尚未有其法定标准品实验，羟丙基四氢吡喃三醇异构体较多，如何确定羟丙基四氢吡喃三醇的优势构型及含量，对于原料商和化妆品企业尤为重要！

基于此，本文实验采用高效液相色谱法和核磁共振波谱法分析玻色因原料，通过比较谱图差异，论证差向异构化是造成玻色因异构体的主要原因，根据相关文献资料和实验确证玻色因的构型，并确定其含量。

羟丙基四氢吡喃三醇

**2009年欧*雅玻色因合成专利**

**2022年深圳瑞*林生物技术有限公司合成专利**

*在欧*雅发表的《新的C-糖苷衍生物及其化妆用途》专利中证实：具有（β，S）构型（简称S构型）化合物对GAGs 新合成的刺激程度远远大于现有技术中混合物形式的化合物所获得的刺激。

羟丙基四氢吡喃三醇

异构体分离测试方法

**1. <文献资料>《破译欧*雅“玻色因”的“黑匣子”》**

色谱柱：XAmide（4.6mm×250mm，5µm），进样体积：10µL，流速：1.0mL/min，柱温：25℃，检测器：ELSD，蒸发室温度：40-50℃，飘移管温度：40-50℃，氮气流速：1.6mL/min，流动相：流动相A-甲醇，流动相B-乙腈。

色谱图见图1，首峰为S构型羟丙基四氢吡喃三醇，末峰为R构型羟丙基四氢吡喃三醇。

图1，文献中欧*雅郝连娜活颜修复舒缓晚霜中羟丙基四氢吡喃三醇的HPLC测试图

2. <内部测试方法>

HPLC定量分析

色谱柱：APS-2（4mm×150mm，3µm），进样体积：10µL，流速：0.8mL/min，柱温：30℃，检测器：CAD，蒸发室温度：35℃，流动相：流动相A-乙腈，流动相B-水。

图2，30%羟丙基四氢吡喃三醇原料（厂家一）的HPLC测试图

图3，羟丙基四氢吡喃三醇原料（厂家二）的HPLC测试图

*方法特点：
1.测试周期短（单针测试时长为8min）
2.检出限较低（CAD仪器检出限1ppm）

3. 玻色因1H-NMR测试图

核磁谱图分析

图4，羟丙基四氢吡喃三醇原料（厂家二）的1H-NMR测试图

由图4核磁谱图可知：厂家二的羟丙基四氢吡喃三醇为S构型。

图5，30%羟丙基四氢吡喃三醇原料（厂家一）的1H-NMR测试图

由图5核磁谱图可知：S-构型羟丙基四氢吡喃三醇与R-构型羟丙基四氢吡喃三醇的比例约为48：52（HPLC测试结果46.6：53.4）。

由图5核磁谱图可知1，3-丙二醇与羟丙基四氢吡喃三醇总量的比例约为9.2：10，且经HPLC定量，HPTROL 30羟丙基四氢吡喃三醇总量为30.6%，所以样品中1,3-丙二醇的含量约为28%。

玻色因原料

微谱测试方案

测试项目	测试方法	备注
水分	卡尔费休水分仪	测试原料中水分的含量。
固含	电热干燥箱	测试原料中不挥发物的含量。固体原料可不做此项。
旋光度	旋光度仪	测试原料的旋光度，玻色因应为左旋结构。
HPLC纯度（S/R构型比例）	HPLC-CAD	测试原料中玻色因HPLC纯度，同时测试S/R构型的比例。
核磁氢谱测试	1H-NMR	测试鉴别原料中主要成分的结构。
*硼酸/硼酸盐残留	IC	测试原料中是否有硼酸/硼酸盐残留。硼酸/硼酸盐为《化妆品安全技术规范》2021版禁用成分。
硼元素	ICP-MS	测试原料中是否有硼元素。硼元素是硼酸/硼酸盐的组成元素之一。
乙酸残留	IC	测试原料中是否有乙酸残留。乙酸有刺激性和异味。