Shotgun可诱导型稳转细胞系构建服务

2023-11-20 14:04:42, Untangled

氨探生物是品生医疗旗下一家由组学质谱技术精英团队匠心多年打造的精准医疗高科技公司，致力于成为全球领先的蛋白质组学、代谢组学临床转化全流程解决方案服务商。

一、Shotgun 多位点整合细胞构建平台

Shotgun 整合系统介绍

氨探生物的Shotgun 稳转细胞系构建系统是基于可移动转座子元件在载体DNA和基因组中高效“切割-粘贴” 特性而开发。在转座子整合过程中，目标基因被克隆在Shotgun 转座子整合质粒中，目标基因两端的转座子识别元件（ITRS）可以被Shotgun 转座酶识别、切割并且“粘贴”到基因组DNA的特异性位点（TTAA）。氨探生物利用高效的Shotgun 转座子系统，开发出一系列Shotgun 载体，这些载体可将目标DNA元件（荧光蛋白、报告基因、目标基因、Cas9、抗体及shRNA等）整合到真核细胞基因组中，实现快速构建稳定细胞系，以达到过表达或诱导调控表达目标元件的目的。

与慢病毒系统相比，Shotgun 系统具有如下优势

· 更加安全，更快的开发周期：无需进行病毒包装、纯化、转染

· 目标 DNA 元件大小没有限制：可将大小在10-100Kb的目标基因整合到基因组中

· 可同时完成多个目标元件的整合，实现插入诱导型表达：降低细胞复制时的负荷，只有在实验时诱导目标DNA元件（基因或 shRNA）

· 提供多个预制的报告基因、抗体表达、shRNA 表达载体

· 高效的转座酶移除系统：瞬转Shotgun 移除酶能够迅速高效移除插入元件，恢复细胞野生型状态

二、 Cumate 诱导型表达系统

氨探生物 Cumate 诱导系统基于 CymR 调控元件，具有高亲和力结合并高效抑制 CuO 转录调控原件的特性。在无毒性Cumate 小分子存在时，目标 DNA表达元件受到抑制，维持在极低的表达水平。而在 Cumate 存在时，可实现对目标 DNA表达元件产生剂量依赖性诱导表达作用。氨探 Cumate 诱导表达系统具有极佳的信噪比，可作为调控开关，实现对目标 DNA元件的精准调控表达。

· 氨探 Cumate 诱导表达系统具有优异等信噪比

· 氨探 Cumate 诱导型表达系统可以精准调控蛋白表达强度

· 可以通过去除诱导剂完全关闭目标表达

三、基于Shotgun 整合系统和 Cumate 诱导型表达系统的产品和应用

Shotgun 荧光报告细胞系构建服务

氨探生物借助高效的 Shotgun 转座子系统，成功开发出一系列 Shotgun 载体，可迅速将目标DNA元件整合入真核细胞基因组中，实现快速构建稳定细胞系，以达到过表达或诱导调控表达目标元件的目的。

我们可将 GFP, RFP 等荧光蛋白快速构建到目标细胞的基因组中，获得稳定表达细胞系，并可以通过 Shotgun 移除系统实现快速移除。

Cumate 诱导型 shRNA敲低细胞系构建服务

除了用于蛋白的诱导表达，氨探生物的 Cumate 系统同样可以用于 shRNA 的诱导表达，实现通过诱导剂调节蛋白质表达水平的效果。搭配氨探生物的高效 shRNA 设计工具和诱导型启动子载体的使用，可快速高效地建立诱导型靶蛋白敲低的细胞系。相较于传统 siRNA，这一方法具有更稳定的表型和极佳的重复性。