动物健康应用攻略第四期 | 诊断是净化PRRS病毒的关键（二）

采样方案

诊断技术常用于临床病例的确诊，但如果养殖企业和兽医希望控制疾病并最大限度降低经济损失，PRRS的预防性监控计划具有绝佳的效果。每月或每季度组合使用血清学和分子诊断以及测序方法进行常规检测，应纳入养殖企业的健康管理计划之中。诊断是确定您所面对的疾病种类的唯一方法，尤其是在出现繁殖与呼吸综合征病情时。

Nienhoff提醒到，农场不仅在出现PRRS病情时需要检测PRRS，在其它情况下也要进行检测，因为流感等疾病的症状与其相似，而且二者可能同时出现，令实际情况更加复杂。

动物福利法规往往不允许在动物没有疑似患病的情况下进行预防性采血。因此，许多养殖企业采用用于进行法定报告疾病的常规监控所用的同批血液样本进行PRRS诊断。更多的常规预防性采样则需要使用新的样本类型，如口腔液。口腔液采样被动物福利法规准许，已成为部分国家的标准操作规范。猪只喜欢啃咬用于口腔液采样的棉绳，这对它们造成的应激也比较小。此外，兽医和养殖企业也更容易实施。

尽管这种操作的创伤性更低，但由于担心漏检，德国的兽医和养殖企业选用口腔液采样的发展步伐一度很慢。但最近陆续发表的若干篇论文，已经清晰的验证了口腔液采样在群体水平的初筛结果。

表1.口腔液采样的建议。参考血清检测的流行率，要检测到至少一例口腔液阳性结果，预计需要进行采样的猪栏数量。如果预测血清中的PRRSV流行率高于50%，仅需要一份口腔液样本/猪栏，即可以95%的可信度检测到一例阳性样本。*

“通过口腔液采样，可以从更少的样本中获得更多的信息。我们采用这种方法来监控阴性猪群，”Nienhoff说，“这种方法的优势包括，更容易采样、更小的应激、更符合动物福利要求。例如，15头份为一组，采用四根棉绳即可采样60头份，每个猪栏放置一根棉绳。如果采用血清来进行检测，需要对60头动物分别进行采血。无论从动物还是从操作者的角度来说，哪种方式更简便都是显而易见的。”

难点在于，由于口腔液样本自身的性质，必须在24小时内低温运输到实验室，从而避免核酸降解。为了克服这一难题并改善样本处理流程，Applied Biosystems提供了GenoTube拭子采样管，专用于快速干燥和稳定液体样本。兽医或养殖企业可以采用GenoTube拭子采集口腔液样本，从而可以实现将样品在室温条件下运送到实验室，并且允许更长的运输时间的各个环节。

优化的样本制备流程

Applied Biosystems提供了经过优化的样本提取工作流程，可以帮助用户从样本获得尽可能最佳的PCR结果。无论采用何种类型的样本，是GenoTube拭子采集的口腔液、血液还是组织样本，最终的目标都是确保结果高度可靠。核心价值的产出依赖于经过优化的完整工作流程-从田间采样到实验室的各个环节。

* 资料来源：科研海报《New insights into oral fluids as a diagnosis procedure to detect and determine the prevalence of PRRSV under field conditions》(2015) Nardy ROBBEN, Thermo Fisher Scientific, Bleiswijk, Netherlands, Anne QUIJADA, Thermo Fisher Scientific, Lissieu, France, Lorenzo José FRAILE SAUCE, University of Lleida, Lleida, Spain

问卷有礼

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