2023-08-14 19:26:13, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge),唇形科鼠尾草属多年生直立草本植物,分布于中国安徽,山西,河北,四川,江苏等地。丹参根主含脂溶性的酮类成分和水溶性的酚酸成分,种根入药,为强壮性通经剂,有祛瘀,生新,活血,调经的效用。主治子宫出血,血瘀,腹痛。对冠心病有良好的治疗效果。此外亦治神经性衰弱失眠,关节痛,疮疖痛肿等。中药中活性物质含量对药效有着重要影响,因此,活性物质含量测定具有重要意义。
本文参考中国药典(2020版),应用SCION高效液相色谱仪对丹参中活性物质丹酚酸B,隐丹参酮,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA进行了分析测定。
实验部分
仪器
采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统:
▪ 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵
▪ SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
▪ SCION LC6310 柱温箱
▪ SCION LC6410 紫外检测器
液相色谱条件
样品的预处理
针对丹酚酸B的样品前处理方法
丹参样品粉碎→过3号筛→丹参粉末0.15g→加入50 mL甲醇-水(8:2)溶液溶解→超声提取30min→过滤→用甲醇-水(8:2)把滤液稀释一倍→HPLC分析。
针对丹参酮类样品的前处理方法
丹参样品粉碎→过3号筛→丹参粉末0.3g→加入50 mL甲醇溶解→超声提取30 min→过滤→HPLC分析→丹参成分分析。
标准样品测定示例
▲ 标准样品的色谱图
色谱峰: 1. 隐丹参酮(5mg/L); 2. 丹参酮Ⅰ(5mg/L); 3. 丹参酮ⅡA(5mg/L)
样品添加回收率
对丹参样品进行添加回收率实验,在66g/kg的添加浓度下,丹酚酸B的加标回收率为97.59%。在333mg/kg的添加浓度下,丹参酮类物质的加标回收率在80.27%~85.64%之间。
▲ 丹参空白样品与添加样品的色谱重叠图
▲ 丹参空白样品与添加样品的色谱重叠图
色谱峰:1. 隐丹参酮;2. 丹参酮Ⅰ;3. 丹参酮ⅡA
重现性
(隐丹参酮,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA 5 mg/L )
标准曲线
系统适用性
(丹参酮ⅡA 20 mg/L ;n=5)
结论
使用SCION LC6000-UV对丹参中活性物质丹酚酸B,隐丹参酮,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA进行了测定,得到了良好的线性和重现性,理论塔板数满足药典要求,为丹参的品质分析提供了解决方法。
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