阿斯巴甜可能致癌？如何测定？

近期，“阿斯巴甜致癌”争议引起广泛关注。国际癌症研究机构、联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会近日发布报告，将阿斯巴甜归为“可能对人类致癌”（2B类致癌物）之列。

阿斯巴甜是国际食品法典委员会（CAC）及中国、美国、欧盟等批准合法使用的食品添加剂。CAC批准阿斯巴甜可用于冷冻饮品、口香糖、糖果、焙烤食品、水产品、调味品、碳酸饮料等，规定最大使用量为0.3g/kg——10.0g/kg。

基于标准要求，可使用悟空K2025高效液相色谱仪测定阿斯巴甜含量。

与阿斯巴甜同属人工合成的二肽类甜味剂的阿力甜，也是人们常用的甜味剂。阿斯巴甜的甜度可达蔗糖的200倍，阿力甜可达蔗糖甜度的2000倍。

此实验，我们用高效液相色谱法，使用悟空K2025高效液相色谱仪测定饮料中两者的含量。

试样中的阿斯巴甜、阿力甜在200 nm处有紫外吸收，经高效液相色谱测定，外标法定量。

色谱柱：C₁₈色谱柱，4.6×250 mm，5 μm或者相当的色谱柱；

流动相：乙腈 - 水（20+80）；

流速：0.8 mL/min；

进样量：20 μL；

柱温：30℃；

检测器及波长：紫外-可见光检测器，检测波长为200 nm。

按照色谱条件进行采集，混合标准溶液（阿斯巴甜和阿力甜浓度均为5 μg/mL）的色谱图如图1所示，积分结果如表1所示。

图1混合标准溶液（浓度均为5 μg/mL）的色谱图

表1 混合标准溶液（浓度均为5 μg/mL）色谱图积分结果

由表1中数据可知，阿斯巴甜的理论塔板数为12959，拖尾因子为1.18；阿力甜的理论塔板数为12977，拖尾因子为1.08。

将混合标准溶液（浓度均为5 μg/mL）连续进样7针，叠加的色谱图如图2所示，结果见表2。

图2 混合标准溶液（浓度均为5μg/mL）连续进样7针叠加的色谱图

表2 混合标准溶液（浓度均为5μg/mL）连续进样7针重复性数据统计

由表2中数据可知，混合标准溶液（浓度均为5 μg/mL）连续进样7针重复性测试，阿斯巴甜保留时间的RSD为0.088%，峰面积的RSD为0.146%，阿力甜保留时间的RSD为0.085%，峰面积的RSD为0.173%，均具有良好的定性定量重复性。

校准曲线

按照色谱条件进行采集，将混合标准系列溶液上机测定，混合标准系列溶液叠加的色谱图如图3所示。

图3 混合标准系列溶液叠加色谱图

阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均呈现良好的线性关系，确定系数R²均在0.9999以上。

含量测定

按照步骤对饮料样品进行处理，并进行加标回收实验。空白溶液的色谱图、样品的色谱图及样品加标的色谱图如图4~图6所示。

图4空白的色谱图

图5 样品的色谱图

图6 样品加标的色谱图

经计算，样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜，加标回收率分别为102.6%和98.6%。

通过对阿斯巴甜、阿力甜的理论塔板数、重复性、灵敏度、线性的测试以及对样品中阿斯巴甜和阿力甜的含量进行测定，实验结果表明：

阿斯巴甜的理论塔板数为12959，拖尾因子为1.18；阿力甜的理论塔板数为12977，拖尾因子为1.08，均有良好的峰型；混合标准溶液连续进样7针重复性测试，阿斯巴甜保留时间的RSD为0.088%，峰面积的RSD为0.146%，阿力甜保留时间的RSD为0.085%，峰面积的RSD为0.173%，均具有良好的定性定量重复性；

灵敏度测试中，阿斯巴甜的仪器检出限为7.229 ng/mL，仪器定量限为24.095 ng/mL；阿力甜的仪器检出限为19.771 ng/mL，仪器定量限为65.902 ng/mL；阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均具有良好的线性关系，确定系数R²均大于0.9999；对样品进行测试，样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜，加标回收率分别为102.6%和98.6%。

因此，Wooking K2025可以满足《GB 5009.263-2016 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》中阿斯巴甜和阿力甜含量测定的需求。