制备未来，KingFisher加速抗体药物研发进程

图1. KingFisher自动磁珠纯化系统在抗体药物研发中的应用

抗体药物前期研发的核心是文库筛选，从而获得高特异性、高亲和力单克隆抗体。噬菌体表面展示文库筛选是主流抗体文库筛选技术平台之一。

图2. 噬菌体表面展示技术示意图 (来自BioCat GmbH)：1.制备噬菌体展示文库；2.和靶标分子混合，捕获特异性结合的噬菌体；3.洗去不能与靶标分子特异性结合的噬菌体；4.将收集到的噬菌体侵染大肠杆菌进行扩增，产生新一轮淘洗的展示文库。

图3. 使用Pierce Protein A/G琼脂糖磁珠或Pierce Protein A/G琼脂糖珠 (10 µL) 分别从小鼠、人类和兔血清 (50 µL血清稀释10倍) 中纯化 IgG，结果显示磁性琼脂糖珠的纯化产量更高。

图4. 分别使用磁力架手工法和 KingFisher 自动纯化方法，使用Pierce Protein A/G 琼脂糖磁珠，从小鼠、人类和兔血清中纯化 IgG，结果显示KingFisher自动纯化结果与手工法相当。

KingFisher磁珠纯化系统搭配Thermo Scientific™ SMART Digest™ 免疫亲和试剂盒可实现快速、简单、高度可重现且灵敏的蛋白质样品制备，这使得生物标记物和生物治疗药物表征和定量更加容易进行。

免疫捕获试剂和温度活化的热稳定性胰蛋白酶被共固定在磁珠上。富集之后，在蛋白质变性条件下通过高温激活酶来加速消化，从而使工作流程耗时数小时，而不需过夜。

图5. KingFisher磁珠纯化系统搭配 SMART Digest 免疫亲和磁珠进行免疫质谱法的原理和操作示意。（点击查看大图）

对获得的单克隆抗体药物需要进行一系列的质控检测，包括宿主细胞 DNA残留检测、宿主细胞蛋白残留检测、支原体检测、病毒检测、微生物检测等，以达到FDA/CFDA的监管要求。

KingFisher仪器搭配Applied Biosystems™ PrepSEQ™ 残留DNA样品制备试剂盒，可从具有挑战性的基质中获得稳定且均一的 DNA 回收率，包括浓度较高、pH 值较低或盐浓度较高的样品。

图6. 使用2台KingFisher Flex进行CHO宿主细胞残留DNA提取，显示1-100 pg/孔加标DNA的平均回收率均在80%以上。（点击查看大图）