猪肉、猪肝中β-受体激动剂残留量测定的整体解决方案—— GB 31658.22-2022

基质：猪肉、猪肝

样品前处理

取试料2g（准确至±0.02）于50 mL离心管内，加0.2 moL/L乙酸铵缓冲溶液6 mL、β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶40 μL，涡旋混匀， 37℃避光水浴振荡16 h，放置至室温，备用。

取备用液，加100 ng/mL内标工作液100 μL，涡旋混匀，8000 r/min离心8 min，取上清液，加0.1 moL/L高氯酸溶液5 mL，涡旋混匀，用高氯酸调至pH值至1.0±0.2；8000 r/min离心8 min后，将全部上清液转移到50 mL离心管中，用10 moL/L NaOH溶液调pH值至10±0.5；加乙酸乙酯15 mL，多管漩涡5 min，5000 r/min离心5 min，取上层有机相；下层水相中再加入叔丁基甲醚10 mL，多管漩涡5 min，5000 r/min离心5 min，取上层有机相，合并，50℃下氮气吹干，用2%甲酸溶液5 mL溶解，备用待净化。

样品净化

SPE小柱：CNW Poly-Sery MCX SPE 小柱（粒径40 μm）（60 mg/3 mL）（货号：SBEQ-CA3279）

活化：3 mL甲醇

平衡：3 mL 2%甲酸水

上样：5 mL提取液

淋洗：3 mL 2%甲酸水、3 mL甲醇，抽干

洗脱：3 mL 5%氨水甲醇（流速控制在0.5滴/s）

收集洗脱液，50 ℃下水浴氮气吹干，准确加入0.5 mL 甲醇-0.1%甲酸溶液（10：90），充分溶解，过0.22 μm PTFE微孔滤膜，供LC-MS/MS测试。

液相色谱条件

a) 色谱柱：五氟苯基柱（3.0×50 mm，粒径2.6 μm）（货号：LAEQ-3005I3）

b) 柱温：30℃；

c) 流速：0.4 mL/min；

d) 进样量：5 µL；

e) 流动相： A相为0.1%甲酸溶液，B相为0.1%甲酸乙腈溶液。洗脱程序见表1。

表1 流动相及梯度洗脱条件

质谱条件

a) 离子源：电喷雾离子源（ESI），正离子模式

b)  碰撞气(CAD): 8

c)  帘气(CUR): 30 

d)  雾化气(GS1): 60

e)  辅助气(GS2): 65

f)  离子喷雾电压 (IS): 5500V 

g)  温度(TEM): 550℃

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备注：单个目标物的谱图由2个图组成，左边是目标物的定量离子对谱图，右边为目标物对应内标物质的离子对谱图。

*更多谱图及方法条件请登录安谱实验官网-技术资料查看

安谱实验参照新版国标《GB 31658.22-2022 食品安全国家标准 动物性食品中β－受体激动剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，测定了猪肉、猪肝基质中18种β-受体激动剂的残留量，结果表明，目标物的加标回收率均在70%-115%，回收率良好，满足国标实验要求。