上新了·Octet！解锁新技能，轻松玩转AAV定量

腺相关病毒 (Adeno-associated viruses, AAV) 作为一种基因递送工具，具有安全性好、免疫原性低、能感染分裂细胞和非分裂细胞，能介导基因的长期稳定表达等优点，是目前基因治疗中的首选载体，包括天然型（AAV）和重组型（rAAV）在内多种血清型。常用的AAV血清型有AAV1，2，5，6，7，8，9，rh10等，不同AAV血清型具有不同的衣壳蛋白空间结构，由于其组织特异性（或亲嗜性）不同而被广泛应用。

图1. AAV载体疗法占在研病毒载体基因疗法的约80%

图2. 不同血清型组织递送特异性

• 为提高AAV病毒载体的质量和产品，需要在多个工艺步骤中快速定量AAV浓度，来高效地优化生产工艺环节

• 目前的方法费时费力费钱，速度慢，难以优化

• 时效性差，流程复杂。客户需要将样品送到分析部门或实验室检测，等待2~5天才会有结果。工艺流程需要等待结果进行下一步工作开展或优化调整

• 基于药典认可的生物层干涉（BLI）技术

• Octet® R8/RH16/RH96高通量分子互作平台

• 5分钟即可一次性检测8/16/96个样品

• AAVX生物传感器，一步法直接定量纯化或粗样品

• 可结合各种血清型：AAV1 ~ AAV9及AAVrh10

• 线性范围宽广：8.5×10⁸ ~ 1×10¹³ vp/mL

• 可再生重复使用~20次，单个样品检测成本更低

• Octet® BLI Discovery v.13.0.1 软件预设AAV定量模板

图3. Octet® AAVX对10种AAV血清型的特异性结合

图4. 使用Octet® AAVX生物传感器对纯化的AAV9衣壳定量

图6. 使用Octet® AAVX生物传感器对AAV9粗样品衣壳定量（含 1% Pluronic F-68的裂解缓冲液，稀释比例3:1；n=3）。结果显示浓度为3.05x10⁹–2.22x10¹² vp/mL。样品回收率在95–105%之间，并且受测浓度具有良好的精密度（CV<10%）。

图7. 使用Octet® AAVX生物传感器和ELISA定量检测纯化样品及粗制样品（生物工艺中间体）中的AAV8和AAV9，数据显示两种方法具有良好的相关性。数据由REGENXBIO Inc.提供。

图8. 使用Octet® AAVX生物传感器和ELISA定量检测AAV生产上游和下游不同步骤中的AAV5（包括纯化样品及粗制样品）滴度。滴度范围为6.73x10⁹至9.59x10¹³ vp/mL，证明Octet® AAVX检测法与ELISA之间具有良好的相关性。数据由BridgeBio Pharma, Inc.提供。

*与Octet® AAVX对比

基于Octet® BLI 和Octet® AAVX 生物传感器的AAV定量检测策略可广泛应用于AAV 上游和下游工艺各阶段，优化传统终点法耗时费力的确定，提供可靠、准确且便捷的AAV定量新思路。