数字PCR获创新医疗器械特别审批，将为肿瘤靶向治疗带来大变化

在国家食品药品监督管理总局医疗器械技术审评中心的官网上，创新医疗器械特别审批申请的审查结果（2017年第3号）表明，芯片式数字聚合酶链式反应（DPCR）分析系统进入创新医疗器械特别审批程序，这意味着该数字PCR相关产品将进入“绿色通道”。DPCR可以与高通量测序（NGS）平台实现优势互补，提供高灵敏度的检测解决方案，有望成为支持液体活检的重要平台之一。

《创新医疗器械特别审批程序》是国家食品药品监督管理总局为了保障医疗器械的安全、有效，鼓励医疗器械的研究与创新，促进医疗器械新技术的推广和应用，推动医疗器械产业发展，总局组织制定了《创新医疗器械特别审批程序（试行）》。迄今，这一特别审批的通过率仅14.7%！

数字PCR究竟有何神通广大，才能通过国家对于创新医疗器械的审批标准？

先看国家食品药品监督管理总局对其工作原理的描述：对目标核酸序列定量和定性检测，用聚合酶链式反应分析法，将具有荧光定量PCR的反应物（TaqMan探针法或SYBR绿色引物法）加载到芯片上，然后用DPCR扩增仪进行热循环反应。芯片反应完成后放到DPCR分析仪上进行成像和分析，输出原始数据，将原始数据放到云端的DPCR软件上分析，并得到最终结果。仪器每处理一个芯片，只要一分钟仪器就能读完芯片。

南京科维思生物科技股份有限公司芯片式数字PCR系统包括仪器设备，芯片相关耗材和配套试剂三个模块组成。技术原理如图所示：采用微流控芯片技术，将样本均匀分配至2万个独立的反应微孔中，每个微孔有0或1或多个目标序列，每个微反应独立检测，提高信噪比，实现对样品的绝对定量，支持高灵敏度的检测需求。相比传统qPCR，数字PCR拥有更加出色的灵敏度、特异性及精密度，是液体活检的首选技术。

数字PCR芯片的使用提供了便捷和直观的机制来同时平行运行上千个 PCR 反应。 每个孔都加入了样品、扩增混合物和 TaqMan™测定试剂的混合物，然后进行单独分析以检测存在（阳性）或不存在（阴性）终点信号。阴性反应孔不存在任何靶标序列，没有信号累积，分析时很容易对靶标分子进行绝对计数，无需标准曲线或内标基因；考虑有的孔可能接收到多个靶标分子，最后结果使用泊松模型进行校正。

数字PCR优势

1.性能卓越

2.操作简单

3.样品适用类型丰富

DPCR和NGS强强联手

开创肿瘤液体活检新时代

2017年3月阿斯利康宣布，CFDA已经正式批准第三代肺癌靶向药物泰瑞沙（甲磺酸奥希替尼片, AZD9291），很快将在中国上市。泰瑞沙用于肺癌靶向治疗，针对EGFR-TKI（酪氨酸激酶抑制剂）药物治疗时或治疗后存在EGFR T790M耐药突变的非小细胞性肺癌的治疗。据悉，阿斯利康比较了NGS、qPCR和DPCR的检测结果后认为，DPCR是AZ9291伴随诊断的首选。检测灵敏度更高，操作更加方便快捷，结果更加明确。

南京科维思生物科技股份有限公司CEO王焱博士介绍“DPCR以患者外周血为媒介取代组织活检，检测肿瘤相关的基因突变的存在，并动态监控其随病程进展及治疗过程发生的演变。结合生物信息分析技术，实现对肿瘤早期诊断、个性化治疗、治疗效及预后评估和监控等工作，从而为癌症病人的临床伴随诊断和个性化治疗提供有力的依据。目前，基于芯片式DPCR系统，我们已经完成五款肿瘤检测试剂的开发工作。”

DPCR以其极高的准确性和灵敏度，实现绝对定量，可以定量分析癌症研究样本中低发生率靶标的罕见突变和小百分比的拷贝数差异，对于EGFR T790M耐药突变的非小细胞性肺癌患者是造福人类的好消息。