高性价比明智之选——未包被Ready-SET-Go!™ ELISA试剂盒

2023-01-28 12:04:01, 赛默飞生命科学赛默飞世尔科技生命科学产品

Invitrogen 未包被和匹配的抗体对 ELISA试剂盒具有未包被板、过夜处理和运行检测所需的试剂。

试剂盒配置提供易用、灵活的选择。对于具有丰富经验，对批间和批内差异要求不太严格的 ELISA 用户，未包被试剂盒和抗体对试剂盒是其节省成本的理想选择。

组分

预处理捕获抗体
预处理检测抗体
重组蛋白标准品
底物溶液
亲和素-HRP
检测缓冲液（样品稀释剂）
包被缓冲液
ELISA酶标板（可选）

优势

预处理和优化 - 匹配的抗体对和所提供的试剂都针对 ELISA 开发进行了优化；
试剂盒配置具有更多选择 - 通过选择包装规格，包括2、10和20板试剂盒，根据您的需求进行购买；
试剂覆盖度高 - 包括限制可变性的所有基本试剂和缓冲液。但不包括通用试剂，如冲洗溶液和终止液；
经济实惠 - 性价比高，有助于最大限度地帮助您的研究成果。

工作流程

详细实验步骤

捕获抗体包被

（1）用包被缓冲液稀释捕获抗体，制备包被溶液。具体剂量请参考试剂的说明书；

（2）用每孔100 μL 的包被溶液包被孔板。盖上孔板，在室温下孵育 1 小时，或者在 2-8℃ 温度下孵育过夜（12-18 小时）；

（3）吸掉各孔的液体，每孔加300 μL 的洗涤缓冲液洗涤 1 次。洗涤后，倒置孔板，在吸水纸上轻轻拍打，清除残余液体；

封闭和加样

（4）在室温下，每孔加入300 μL 封闭缓冲液，封闭 1 小时；

（5）吸掉各孔的封闭液，倒置孔板，在吸水纸上轻轻拍打，清除残余液体；

（6）用封闭缓冲液制备标准品和样品稀释液；

（7）将 100 μL 标准品（一式两份）和样品加入指定的孔中。在室温下温和持续地摇上 1-2 小时（约 500 rpm）；

（8）吸掉各孔的液体，每孔加300 μL 的洗涤缓冲液洗涤 5 次。洗涤后，倒置孔板，在吸水纸上轻轻拍打，清除残余液体；

检测抗体和HRP二抗孵育

（9）用包被缓冲液稀释捕获抗体，制备包被溶液。具体剂量请参考试剂的说明书；

（10）用每孔100 μL 的包被溶液包被孔板。盖上孔板，在室温下孵育 1 小时，或者在 2-8℃ 温度下孵育过夜（12-18 小时）；

（11）吸掉各孔的液体，每孔加300 μL 的洗涤缓冲液洗涤 1 次。洗涤后，倒置孔板，在吸水纸上轻轻拍打，清除残余液体；

（12）用封闭缓冲液按照1:5,000 的比例稀释，制备链霉亲和素-HRP工作液。例如，要制备满足1个孔板需求的工作液，可以将 2μL链霉亲和素-HRP 与 9.998 mL 的封闭溶液混合，制备出10 mL 的工作液；

（13）向每孔加入100 μL 的链霉亲和素-HRP 工作液。在室温下温和持续地摇上1 小时（约 500 rpm）。

检测

（14）吸掉各孔的液体，每孔加300 μL 的洗涤缓冲液洗涤 5 次。洗涤后，倒置孔板，在吸水纸上轻轻拍打，清除残余液体；

（15）向每孔加入100 μL 的 TMB 底物溶液。在室温下孵育孔板30分钟或者更长时间，直到溶液达到所需的颜色强度为止；

（16）向每孔加入100 μL 的终止液；

（17）加入终止液的30 分钟内，用酶标仪在 450nm的波长下测量每孔溶液的吸光度；

（18）用双对数直线拟合或四参数曲线拟合计算结果。

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大规格价格更实惠

Ready-SET-Go!TM ELISA提供2块、10块和20块加样板（96孔）的试剂盒规格，试剂盒包括执行分析所需的全部试剂（但不包括洗液和终止液）。

ELISA试剂盒DIY辅助试剂

ELISA试剂盒DIY之“黄金搭档”

根据需求不同，Invitrogen还可以为DIY试验提供预优化各种辅助试剂，如底物及各种缓冲液。

下列产品为Invitrogen 未包被Ready-SET-Go!™ ELISA试剂盒组分单独售卖品类，均已经过验证，可自行搭配适用于DIY ELISA试剂盒。现货供应

点击查看大图👆🏻

Nunc MaxiSorp™ flat-bottom

推荐使用 Nunc MaxiSorp™ 高蛋白结合容量 96 孔 ELISA 板捕获在 eBioscience Ready-SET-Go! ELISA 试剂盒以及 ELISA 其他匹配抗体对中发现的免疫球蛋白。Maxisorp 板的蛋白结合容量约为 600-650 ng IgG/cm2。

ELISA/ELISPOT Coating Buffer Powder

-推荐大多数蛋白质使用

eBioscience ELISA/ELISPOT 包被缓冲液粉是磷酸盐缓冲液干粉。每包用1升去离子蒸馏水中溶解，然后使用0.22 μm 过滤器过滤。得到的1x PBS（pH 7.4）适合用作 ELISA/ELISPOT 包被缓冲液。

eBioscience™ ELISA/ELISPOT

稀释液 (5X)

eBioscience™ ELISA/ELISPOT 稀释剂是一种磷酸盐缓冲液，添加了胎牛血清作为动物血清蛋白源。该缓冲液可用于阻断 ELISA 板的非特异性结合、稀释重组标准品和测试样品以及制备二级检测试剂，该稀释液还含有防腐剂。

ELISA 稀释剂旨在用作

（1）ELISA 板封闭剂

（2） ELISA 标准品和样品稀释剂

（3）检测抗体稀释剂

（4）HRP 结合物稀释剂

eBioscience™ ELISA Wash Buffer

1 L 包（粉剂）

eBioscience ELISA Wash Buffer 粉剂是含 0.05% 吐温-20 的磷酸盐缓冲盐水的干粉配方。每个包在 1 升蒸馏去离子水中复溶；获得的 1x PBS/吐温-20 缓冲液（pH 值 7.4）适用于洗涤 ELISA 板微孔。提供 10 包 ELISA 洗涤缓冲液粉剂，可总计生成 10 升 1x 洗涤缓冲液。

eBioscience™ Avidin HRP

最受欢迎，可用于Western 印迹、ELISA

辣根过氧化物酶标记亲和素常用作通过 ELISA 和 Western 印迹检测生物素化抗体的第二步。亲和素能以高亲和力与生物素结合。[ 注：叠氮化钠是一种辣根过氧化物酶酶活性抑制剂，不应将其添加至 AV-HRP 稀释液中。]

eBioscience™ TMB Solution (1X)

最受欢迎

1x eBioscience TMB 溶液是一种灵敏的发色底物，以单一即用型溶液形式提供。TMB (3,3’,5,5’-四甲基联苯胺) 是辣根过氧化物酶 (HRP) 的底物，推荐用于 Ready-Set-Go! ELISA 试剂盒。

在酶促反应过程中，TMB 底物将产生蓝色，可以分光光度计上 650 nm 处读取。该动力学反应可以用 1 M 磷酸停止，导致颜色变化至可以在 450 nm 处读取的黄色。

全套ELISA缓冲液试剂盒

ELISA Buffer Kit （货号: CNB0011）

关于全套 ELISA试剂，请参阅 Invitrogen ELISA 缓冲试剂盒（货号：CNB0011，包括：2瓶包被缓冲液（pH 7.4和pH 9.4）、检测缓冲液（封闭缓冲液）、洗涤缓冲液、稳定的TMB和终止液。将其与匹配抗体对试剂盒（包含匹配抗体对试剂盒配对、标准品和链霉亲和素-HRP）配对使用。

试剂盒组分