小融科普丨血红蛋白病对糖化血红蛋白检测的影响

2022-11-25 11:42:36, 小融 融智生物科技(青岛)有限公司


血红蛋白病是中国南方地区最常见的遗传性疾病之一。遗传变异的不同导致临床表现的差异,有的无显著临床症状,有的出现不同程度的贫血,严重类型的患者需要输血或在妊娠期可导致胎儿流产和死亡。

糖化血红蛋白能够反映近2~3个月整体血糖控制水平,是糖尿病筛查和血糖控制应用于临床广泛使用的指标。近年来多项研究显示,因测定方法的差异,血红蛋白病对糖化血红蛋白的准确测定存在不同程度的影响。

血红蛋白病对HbA1c检测的影响


血红蛋白病是由于珠蛋白基因发生缺陷,致使珠蛋白分子的结构发生改变或使珠蛋白肽链合成减少或缺失,从而导致的一组遗传性溶血性疾病。前者称为异常血红蛋白或血红蛋白变异体,后者称为地中海贫血或珠蛋白障碍性贫血。在我国,血红蛋白病主要见于长江以南的人群,其中广西人群中血红蛋白病基因携带率最高,达到22.3%。

轻型β地中海贫血往往使HbA1c的检测结果偏低,重型β地中海贫血由于两条β肽链发生突变,无法合成Hb A和HbA1c,不同的检测系统得出的测定结果不一,某些测定方法受β链变异影响较大,测定结果与患者实际结果偏差较大,容易误导临床用药,影响治疗效果,更严重的情况下甚至危及患者性命。

下图反映了不同检测系统受变异血红蛋白的影响情况:

7 种常见血红蛋白变异体对6 种检测系统的影响( 对比sebia 毛细管电泳法)

参考文献:Anping Xu,Yajun Wang. et al. Evaluation of MALDI-TOF MS for the measurement of glycated hemoglobin. Clinica Chimica Acta. 2019, 498(154–160).
质谱法检测有效排除变异血红蛋白干扰


1)MALDI-TOF MS工作原理

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是近年发展起来的一种新型的软电离生物质谱。它的工作原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能量传递给生物分子,从而实现生物分子的离子化电离。离子在电场作用下加速进入飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,即通过测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比来检测离子。

MALDI-TOF MS工作原理示意图

2)MALDI-TOF MS检测HbA1c原理

融智生物基于QuanPRO蛋白定量质谱系统,开发出DSMSATM直接定量法。利用MALDI-TOF MS方法直接检测游离的珠蛋白链。其检测原理是根据糖化与非糖化β珠蛋白链相差162Da分子量的差距,对糖化及非糖化血红蛋白进行飞行时间质谱分析,通过峰面积公式:S糖化β珠蛋白链/(Sβ珠蛋白链+S糖化β珠蛋白链)来计算目标样本糖化率。

此方法可以有效将血红蛋白与糖化血红蛋白的检测区分开来,在检测糖化血红蛋白的同时,还能发现变异的血红蛋白,为临床检验提高准确性及检测效率。

血红蛋白β 链糖化峰质谱图叠加图

注:三种不同糖化率样本:6%,9% 及14%,每种样本重复24 次点样测试(CV 分别为1.39%、0.71% 及0.62%,R2=0.9992),共计72(3 x 24) 次测试质谱图叠加图

目前, HbA1c检测结果的影响因素是国内外的研究的重点,如地中海贫血和异常血红蛋白,而建立适用于地区人群的HbA1c及地中海贫血筛查则是今后的关注热点。融智生物所开发的糖化血红蛋白检测方案,基于QuanPRO平台,配合样本制备系统,可实现从临床血样到糖化结果的全流程自动化。

产品特点:

● 最快30s完成一个样品的检测,保障筛查效率

● 良好的精密度和准确度,提升筛查质量

● 较低的耗材费用,降低筛查成本

● 可同时进行血红蛋白病的筛查,助力临床诊断

● 被专家委员会评定为值得临床推广的检测系统

# 参考文献 #

李友琼,血红蛋白病对糖化血红蛋白测定结果的影响[J].中国临床新医学,2022(8):773-776



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