高精度 SC 基质喷涂仪 Q&A 第1期

2022-10-12 14:04:12, 华质君 华质泰科生物技术(北京)有限公司


1、为什么基质结晶的尺寸重要?

基质结晶尺寸及均匀度与 MALDI 或 AP-MALDI 质谱成像的分辨率灵敏度高低均密切相关。

基质与待分析物质的沉积晶体颗粒在被激光击中的瞬间会熔融、脱附和解离,激光光斑所及之处将留下一连串的竖井痕迹。

当晶体尺寸及激光光斑直径均显著小于待测物表面的最小面积(即成像分辨率的靶点下限)时,此最小靶点上能生成数个灼痕,面积精控且大小均一。此时,其他临近靶点上的晶体不被熔融干扰,从而保障质谱成像的点对点的高清晰度空间分辨,避免生物体组织或材料表面的不同部位的信号交集或干扰。

此时若配合使用高频激光,同一靶点将能均衡稳定和持续地产生信号离子,而不需要过高的能量(高能量激光易引致分解)。通过累加多重信号(MCA),提升和完善超痕量生物标志物分布成像的高敏测定。

通过专利的喷嘴设计和喷涂流程优化,高精度 SC 喷涂仪较易实现几百纳米尺寸的细小而均一的基质与样品的共结晶颗粒。“晶体尺寸” 细节可后台留言索取。

2、喷涂速度如何?

高精度 SC 喷涂仪可在很短的时间内完成喷涂。

脂质的基质喷涂常于10分钟内完成;标准玻片(25 x 75 mm)的基质全覆盖需5-7分钟。另,肽段的基质浸提约另需15分钟。
3、基质喷涂时不需要加热喷嘴、雾化气或靶板吗?

有的喷涂仪需依靠加热喷嘴或雾化气,甚至通过加热靶板,辅助挥干基质溶剂中的水分。副作用是生物样品的原生态及酶活性会因为加热而导致降低甚至自溶和破坏。

高精度 SC 喷涂仪通过程序调节喷涂流量和喷嘴高度,来实现基质的高效雾化和溶剂脱除,无须加热,保障生物组织样品的原生态不受侵蚀。
4、如何调节喷雾的湿度?
高精度 SC 喷涂仪通过调整喷嘴与样品间的距离控制喷雾的干燥程度。距离最大时,即使是纯的水溶液,也易实现喷雾的绝对干燥。喷嘴离样品的距离越近,样品表面就会越潮湿,溶剂对待测分子的萃(提)取效率就会越高。交替调高和调低喷嘴对成像品质至为重要。高精度 SC 喷涂仪能以毫米级的精度自动调整喷嘴和样品间距。
5、节假日关机前是否需要清洗?假日后发现开机不工作怎么办?

喷涂仪经过节假日的久置,针泵、喷嘴和管路中残留的基质会发生干结粘连,造成设备无法工作。为避免基质残留影响开工后的使用,关机前需进行清洗和排空。

具体步骤请点击链接获取↓

假日后首次开机如发现工作不正常,大多是因基质风干残留造成的,通常可自行拆卸针泵等活动部件并超声清洗,排除故障。
6、喷嘴的高度设置与成像效果有关吗?
喷嘴的高度影响基质溶剂的挥发程度,而样品表面附着的溶剂会将生物大分子(蛋白、多肽)或有机小分子(代谢物、药物等)溶解提取出来,提取的效果直接影响后续的 (AP) MALDI 成像。高精度 SC 通过调节 Z 值来设置喷嘴和样品之间的距离。
7、喷雾的干燥程度会影响结晶尺寸吗?
一般来说,喷雾的干燥程度与尺寸结晶大小是正相关的,喷雾越干燥,结晶尺寸越小。
8、结晶尺寸越小,成像的效果越好,可以这样认为吗?

从空间分辨率的角度来看这是正确的,为了实现更好的空间分辨率,我们确实需要结晶尺寸尽可能的小。

但同时需要注意的是,有利于结晶的喷雾条件对样品表面化合物的溶解提取是不利的,如只考虑采用最有利结晶尺寸的极端条件,有可能会使得化合物无法被基质浸润提取,导致成像失败。

成像实验需要实现结晶与提取两者间的平衡。
9、是否需要提高溶剂里水的含量,加大喷雾湿度以帮助化合物的提取?

水的含量不需要刻意加大,常用的30%比例即可。基质溶液中有机相的挥发速度比水快得多,在喷雾到达样品表面时,水相的比例已经比溶液状态时高很多了。

另外,过于潮湿的喷雾会将溶解的化合物冲刷位移,造成成像结果失真。


功能优势

● 100%生物相容性材质,无铁锈

大多数基质本身是酸,如使用不锈钢管路,会导致金属离子“渗出”。铁锈,是常见的普通喷涂仪易现的污染源,造成 MALDI 成像出现假信号


 全自动化的 GUI 图形界面易学易用

基质的喷涂(<1min)、配液、清洗、和填充全自动运行。


● 纳米雨润,均一重现

精巧针泵控速,高精无脉冲。

独享专利喷涂程序,涂层均匀、基质最小结晶体 100~150 nm(HCCA)、或 1-2 μm(DHB),涂层非常均匀。结晶方法选择可参阅手册,借鉴如,用于酶消化后的肽和聚糖分析以及酶本身的应用案例。


 安全节约

分配器系统死体积小,通过软件精确设定和控制喷雾区域,可大大节省基质用量。

视频:MALDI Sprayer 超高精度基质喷涂仪

视频:CF-Spotter 超稳连续流点靶仪

产品简介:

高精度 SC 以高精度和超低流量,自动输送和喷涂基质溶液,适用于 MALDI 或 AP-MALDI 点靶、MALDI 或 AP-MALDI 质谱成像(MSI)实验中的基质喷涂、以及与纳升 HPLC 相联进行特定馏分收集或点靶(LC-Spotting)。

其中,MALDI 或 AP-MALDI 质谱成像(MSI)能显示蛋白质、肽、药物及其代谢物、生物标志物或其他化合物在人体、动物或植物组织等薄片样品中的空间分布,是生物标志物表征、药物开发、及创建三维分子图像的重要工具,常与其他成像技术(如磁共振成像 MRI)联合使用。

样品制备往往是限制 MSI 空间分辨率的重要因素。以超高精度基质喷涂仪制备样品,保障基质结晶细小且覆盖均匀,避免发生不期出现的分析物冲刷流失。

针对 MALDI 或 AP-MALDI 成像应用,分配器系统配备有 PEEK(化学惰性)六通阀,分别连接多路溶液(如不同酶或基质),由浅显易懂的软件来控制实现自动化喷洒、通道切换、通路自清洗、和分配器与注射器内基质的填充,而无需手调。

喷雾方向每隔一层旋转90°,实现最高质量的喷涂效果。分配器和喷嘴之间的自动弹压确保喷雾流量的恒定和涂层的高度均匀化。

新一代气动喷雾器配备新式载玻片固定托架,兼容所有常见的 ITO 导电玻片、或特殊尺寸的 MALDI 靶板(喷雾区域≥12 x 16 cm),直接于载玻片或靶板上涂覆基质或样品。

使用专利的(WO 2017/025205 A1)喷嘴和喷涂程序,喷雾的均质性极高,避免了常规喷涂仪极易发生的分析物被冲刷流失现象。

部分代表用户

• 诺米,中国

• 农大,中国

• 拜耳,德国
• 生物梅里埃(Biomerieux),法国
• Contipro,捷克
• 礼来制药,美国
• 法兰克福大学药化所,德国
• 赛诺菲(Sanofi),德国
• Technologie Servier, 法国
• DKFZ(德国癌症研究中心),德国
• 马-普所微生物所,德国
• 诺华制药,瑞士
• 莱斯大学医疗中心,荷兰
• 联合利华,荷兰
…… ……


欲了解更多应用,敬请联系我们!

电话:010-6439 9978

邮箱:info@aspectechnologies.com


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