UPLC-分离的极致

色谱的核心是分离，能够精准分离各个组分物质，UPLC相对于HPLC来说，将分离做到了极致。

UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸品质的同时，保留其原有的实用性及原理。

其最显著的优势是可以缩短分析时间，提高工作效率。

使用UPLC确实能明显缩短分析时间，提高效率（如某有关物质分析方法，使用HPLC运行一针是75分钟，UPLC完全可以在10分钟内搞定），分析效率提高将近7.5倍。

当然了，分析效率提高这么多，其配套设备肯定也不是闹着玩的。UPLC需要小颗粒杂化填料（1.7um）的色谱柱、更高耐压（达15000Psi）、低系统体积的输液单元。

样品的制备同样是过滤和离心两种方法。

过滤：根据样品溶液的极性，选择不同材质的0.22um滤膜过滤。

滤膜的选择，要进行分析方法确证，滤膜的相容性实验。

此处强调一下，必须是0.22um，千万不要用错。

离心：采用高速离心的方式（大于10000转/分钟）。

离心的方法一般适用于过滤较困难的溶液，为了保护UPLC的系统，离心完毕后建议再次进行过滤。

所用有机相应是进口的色谱级别。使用的水应为超纯水，MILLI-Q纯水机生产的即可。

配制缓冲盐溶液应该有效期的规定，根据各实验室SOP规定。

UPLC系统使用的所有流动相均必须经过0.22um的微孔滤膜过滤

有关流动相，具体请查看以下文章：

流动相宝典2

解决流动相气泡问题

流动相宝典

色谱柱的使用，点击下面连接查看以往文章：

一文搞定液相色谱柱

色谱柱使用宝典

色谱柱的报废要素：

1.色谱柱堵塞，压力升高1000psi。

2.色谱柱污染出现鬼峰、噪音增加、检测限增大时。

3.填料塌陷或污染引起色谱图前沿、拖尾、分叉时。

4.理论板数、分离度、拖尾因子按各检品质量标准规定执行，未规定的按各国药典通则规定执行，不符合上述规定时。

所用溶剂为异丙醇，原因：排除系统中空气的最好溶剂。

2.使用缓冲液后冲洗系统：

所用溶剂为二次蒸馏水，原因：再溶解缓冲液结晶的最好溶剂。

3.更换溶剂后：

所用溶剂为二次蒸馏水，原因：再溶解缓冲液结晶的最好溶剂。

泵的注意事项：

液相之泵维护

液相泵模块拆解