2022-09-13 21:40:05, 食品安全的守护者 山东美正生物科技有限公司
检测方法概述
碱性磷酸酶(ALP)和乳过氧化物酶(LPO)属于酶类,具有高度的专一催化活性,可通过测定其相应底物或产物的光学反应来确定酶活性。
ALP检测方法
90年代以前,ALP 活性的检测方法只有比色法,检测限最低约为500 mU/L,该值是早期欧盟和美国判断巴氏杀菌乳ALP阴性或阳性的标准。2004年,中国农业农村部发布的NY/T 801-2004 《生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定》标准中,规定了苯酚法来进行生鲜牛乳及乳制品中ALP的活度测定。
近年来,新方法层出不穷,如,荧光法、发光法、电化学法等,与比色法相比,这些方法在灵敏度、特异性、稳定性及检测速度等方面都有了很大提高。
2003年,随着荧光法和发光法的发展,美国国家州际奶业运输委员会(NCIMS)对巴氏杀菌奶条例(PMO)进行了修改,判定标准调整至350mU/L。
2006年,欧盟(EU)实验室工作组也推荐采用350mU/L作为判定标准,同时还设定了一个目标值100mU/L,如果乳品厂生产的巴氏奶的ALP活性超过此水平,就要对该加工厂进行安全审查。
2021年,中国农业农村部部发布NY/T 3799-2020 《生乳及其制品中碱性磷酸酶活性的测定 发光法》中规定,若样品中ALP活性≥350mU/L,则样品疑似阳性,需通过试验确认是否存在耐热型碱性磷酸酶或复活型碱性磷酸酶。
LPO检测方法
目前,国内外有关LPO检测方法的研究较多,大多是基于颜色反应,利用酶促反应原理,借助分光光度计测定酶活大小。
常用的显色剂有2,2''-连氢基-双(3-乙基苯并嚷吡咯咻-6-磺酸)、二氨盐(ABTS)、3,3'',5,5'' -四甲基联苯胺(TMB)、愈创木酚、苯胺及邻苯二胺等。
中国食品科学技术学会发布的T/CIFST 008-2022 《乳中乳过氧化物酶活性的测定 比色法》中,使用TMB作为底物,通过比色法测定乳中LPO的活性,规定在温度20 ℃-30℃、pH 6.5-7.2条件下,每分钟催化氧化1μmol底物TMB所需要的LPO的量表述为1个乳过氧化物酶单位,即1U。
随着乳企对方法实用性、便捷性要求的提高,商品化酶检测试剂盒逐渐被乳企企业和相关检测单位接受,成为目前市场主流应用产品。
参考文献:
[1] 张昊. 乳及乳制品中碱性磷酸酶和乳过氧化物酶活性检测方法的评估及应用[D].兰州大学, 2019.
[2] 申军士,王加启,卜登攀,魏宏阳,兰欣怡. 乳中碱性磷酸酶活性测定方法研究进展[J].中国乳品工业, 2009,37(06),31-34_
[3] 辛岩,车红霞. 乳过氧化物酶检测方法的研究进展[J] 农产品加工,2015,(11),69-72.
04-23 飞飞
【报名火爆】2024单细胞蛋白质组学技术与产业应用研讨会线上直播通道发布!04-23
特洁安Aquafine助力河南电子半导体客户高品质生产,为“中国芯”提供有力保障04-23
Aliben动态 | 俄罗斯科学院院士Valery Tuchin教授到访艾立本科技参观交流04-23 艾立本科技
春启青莲礼,血浆免费试 | 高深度血浆蛋白质组限时免费测!04-23
德国元素TOC总有机碳分析仪线下用户培训邀请函(第一轮通知)04-23
最高91分,机会巨大!答题赛最后12小时,通道即将关闭!04-23 市场宣传部
【 Stage-RTL反射率测试】典型配置、硬件说明、软件操作04-23
从专家共识看吉比爱如何布局质谱自动化及应对临床质谱挑战04-22 华大吉比爱
精彩回顾|华大吉比爱质谱整体解决方案亮相第五届北京临床质谱论坛04-22 华大吉比爱
汪建:三十而立,要立得正、立得稳,走出一片新的光辉04-22 华大集团
尹烨:想成为对人类历史有伟大贡献的组织,就必须秉承痴心和使命04-22 华大集团
答题有礼|世界地球日,与哈希一起保护世界上最重要的资源04-22
世界地球日,哈希助力保护水资源04-22
【惊喜不断】前处理产品秒杀季,超低优惠!04-22 电商部
德国元素耗材之星 | 线状铜(还原铜)04-22
飞凡焕新,锂想质选 | 赛默飞亮相CIBF202404-22
重磅 | 赛默飞与高校分测分会再续合作新篇章,赋能本土科研创新与人才培养04-22
农业新质生产力从生物育种开始04-22 飞飞
飞凡焕新,锂想质选 | 赛默飞亮相CIBF202404-22