液相分析常见问题④ 盐析

盐析的危害

对于仪器

系统堵塞

系统压力升高

泵压力波动增大

基线不平……

对于色谱柱

柱压上升

峰形变差、裂峰

无法正常进行样品分析……

要注意这些方面

在使用含盐流动相时必须要特！别！注！意！以下几方面：

未开封的新色谱柱

大阪曹達的新色谱柱，出厂保存液大多为100%乙腈（具体保存液种类请务必通过色谱柱盒内所附柱效报告单进行确认）。

因此，为避免盐析，YoYo建议您按照以下步骤处理新色谱柱：

①先使用与流动相组成比例相同但不含盐的溶液进行冲洗置换（避免使用纯水），时间建议1h以上

②使用含盐流动相进行平衡

③正常分析

已使用过的色谱柱

对于已开封使用过的色谱柱，需要了解使用履历，知晓前一次实验的条件、用完柱子后的最终保存液，判断是否需要再次进行保存液置换和过渡。

建议用户建立实验室色谱柱管理表格，将色谱柱的使用履历（分析项目、流动相条件）、使用情况（柱压、用后柱效）进行记录，按照流程进行色谱柱的冲洗、保养和储存，方便对色谱柱进行管理。

在方法开发过程中，多数情况会涉及不同缓冲盐体系和不同有机相体系的各种尝试，那么在调整、更换流动相组成的过程中，请务必充分考虑到不同种类缓冲盐的溶解情况。

一般情况下，盐的溶解能力：

有机酸盐＞无机酸盐

最常用的磷酸缓冲盐中，溶解能力：

铵盐＞钾盐＞钠盐

若不确定所使用的缓冲盐和有机相之间的互溶情况，可按照不同比例将二者混合，静置30min，观察底部是否有沉淀或絮状物产生。

当涉及缓冲盐-有机相梯度条件时，请确认缓冲盐在梯度条件中有机相最高点是否能够充分溶解。

当然，不确定的时候也可以和上述方法一样，将缓冲盐和有机相按照梯度最高比例混合后静置，观察是否有沉淀产生。

对于色谱柱使用时隔夜以及使用完后的保存，同样不能掉以轻心。

当实验环境昼夜温差较大时，建议在夜间也要保持柱温（尽量使用柱温箱），并进行持续的小流速通液，以防止盐析；

实验完毕后，使用不含盐的流动相（将缓冲盐相更换为纯水）对色谱柱和仪器进行冲洗置换，同样，在冲洗置换过程中不能使用纯水。

不知道今天的攻略有没有帮助到正在配置缓冲盐的你呢~

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