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厚朴的分析
厚朴药材为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干燥干皮、根皮及枝皮。
2020版《中国药典》第一部厚朴项下规定了对厚朴酚与和厚朴酚的含量测定系统适用性要求,即理论塔板数按厚朴酚计算应不低于3800。
厚朴酚
和厚朴酚
使用DAISOPAK SP-100-5-ODS-P;4.6mm i.d.×250mm色谱柱,对厚朴酚、和厚朴酚系统适用性溶液以及厚朴供试品进行分析。
结果如图1、表1、2所示,在药典原条件下,系统适用性溶液与供试品中厚朴酚峰理论塔板数分别为14050与15484,均可满足药典要求(不低于3800),同时分离度与峰型均良好。
图1系统适用性溶液与供试品分析色谱图
【色谱条件】
流动相:水/甲醇=78/22
流 速:1.0 mL/min
温 度:25 ℃
检 测:UV 294 nm
系统适用性:厚朴酚40 μg/mL,和厚朴酚24 μg/mL
供试品溶液:参照药典配置
进样量:4 µL
甘草的分析
甘草药材为豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和根茎。
《中国药典》第一部甘草含量测定要求理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000。
甘草苷
甘草酸铵
使用DAISOPAK SP-100-5-ODS-P;4.6mm i.d.×250mm色谱柱,对对照品溶液及甘草供试品溶液进行分析。
结果如图2、表3、4所示,在药典原条件下,对照品溶液与供试品溶液中甘草苷峰理论塔板数分别为20794与20776,均可满足药典要求(不低于5000),同时分离度与峰型均良好。
图2对照品溶液与供试品溶液分析色谱图
【色谱条件】
流动相:A 乙腈,B 0.05%磷酸
B% 81% (0min)->81% (8min)->50% (35min) ->0% (36min) ->81% (40min) ->81% (47min)
流 速:1.0 mL/min
温 度:25 ℃
检 测:UV 237 nm
对照品溶液:甘草苷20 μg/mL,甘草酸铵0.2 mg/mL(溶剂:70%乙醇)
供试品溶液:参照药典配置
进样量:10 µL
白芷的分析
白芷药材为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根。
2020版《中国药典》第一部白芷含量测定要求理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3000。
欧前胡素
使用DAISOPAK SP-100-5-ODS-P;4.6mm i.d.×250mm色谱柱,对对照品溶液以及白芷供试品进行分析。
结果如图3、表5、6所示,在药典原条件下,对照品溶液与供试品溶液中欧前胡素峰理论塔板数分别为10432与10086,可满足药典对理论塔板数的要求(不低于3000),峰型略前延,推测可能出现了溶剂效应。
图3对照品溶液与供试品溶液分析色谱图
【色谱条件】
流动相:水/甲醇=45/55
流 速:1.0 mL/min
温 度:30 ℃
检 测:UV 300 nm
对照品溶液:对照品溶液:欧前胡素:10μg/mL(溶剂:50%甲醇)
供试品溶液:参照药典配置
进样量:20 µL
为改善峰型前延,尝试使用50%甲醇作为对照品溶液溶剂,同时将供试品溶液使用水倍比稀释,重新进行分析。
结果如图4、表7、8所示,更换样品溶剂后,对照品溶液与供试品溶液中欧前胡素峰理论塔板数分别为19448与19080,可满足药典要求(不低于3000),峰型良好。
图4更改溶剂后对照品溶液与供试品分析色谱图
计算,白芷供试品溶液中含欧前胡素(C16H14O4)0.18%,可满足药典要求(不得少于0.080%)。
综合上述,DAISOPAK SP-100-5-ODS-P;4.6mm i.d.×250mm色谱柱可满足药典对厚朴、甘草和白芷的分析要求。
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