2022-04-26 19:31:50 沃特世科技(上海)有限公司
上期,我们分享了Premier SEC分析ADC的应用(点击回顾)。Premier SEC分析ADC的流动相中无需加有机相扫尾,这得益于新的键合相-羟基化聚环氧乙烷的修饰,抑制了ADC的疏水作用。本期分享的应用案例围绕双抗进行,针对双抗的结构特点,Premier SEC的技术做了全面提升。
双抗的分子量更大
双抗的分子量通常在200k左右,因此聚合物分析需要更大的孔径。
针对双抗的这一特点,Premier SEC将孔径调整为250Å,并对其分布重新做了优化,使双抗的聚合物更容易分开,并保持良好的片段分离能力。
图1. Premier SEC(下图)分离双抗对比色谱图,与经典BEH200色谱柱(上图)相比,聚合物和碎片的分离明显改善。
双抗的N糖会有更多唾液酸化
这一特点使双抗更容易与色谱柱发生吸附作用,从而影响分析方法的回收率,重现性也会因此变差。
图2. Premier SEC产品示意图
Premier SEC的柱管采用最新技术屏蔽双抗与填料及柱管接触减小了这一不利影响:
新型键合相 — 采用羟基化的聚环氧乙烷键合相,提升了屏蔽极性吸附的效果;
HPS柱管技术 — 采用专利技术屏蔽筛板和柱管内表面,蛋白与金属离子不再接触;
图3. Premier SEC屏蔽了吸附,因此在低盐流动相中仍有对称的峰形(左)。
采用抗体标准品进行质控控制;使Premier SEC质控标准更接近实际样品,重现性有了更多保证。
图4. Premier SEC色谱柱的COA报告色谱图(4个批次)。
因此,采用Premier SEC分析双抗,将可以更快更轻松地建立分离方法,而且在双抗分析方法生命周期中表现更稳定,具体表现在:新色谱柱不需要老化,方法回收率明显提高,批次重现性也有了质的飞跃。
Premier SEC下期预告:还在筛SEC柱子?用Premier SEC建个平台试试吧!敬请期待!
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