GPC与光散射检测器联用测定透明质酸钠的绝对分子量及其分布

2022-03-23 01:40:06 东曹（上海）生物科技有限公司



透明质酸钠是一种天然直链多糖，由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖以双糖单位交替连接而成。它广泛存在于机体中，以关节腔、皮肤、眼玻璃体、软骨、脐带等组织中的含量较高。

目前，透明质酸钠的应用领域主要集中在医药、临床诊治和化妆品行业。在医药领域其广泛应用于各类眼科手术，还可用于治疗关节炎和加速伤口愈合。

本应用是参照医药行业标准YY/T0308-2015《医用透明质酸钠凝胶》，将东曹HLC-8420GPC凝胶渗透色谱仪和LenS3光散射检测器联用，对透明质酸钠样品的绝对分子量、分子量分布及回转半径 (Rg) 进行了表征。





01

 分析条件 

仪器:  HLC-8420GPC & LenS3

色谱柱: TSKgel G5000PWXL+G6000PWXL (7.8mmI.D.×30cm×2, 13 μm)

流动相:  0.1 M NaNO3

流速:  0.5 mL/min

样品浓度:  1.0 mg/mL

进样量:  100 μL

温度:  40℃

样品:  透明质酸钠

02

 分析结果 


图1  多检测器测试谱图

（紫色曲线为示差(RI)检测器信号，红色曲线为10°角光散射(LALS)检测器信号，蓝色曲线为90°角光散射(RALS)检测器信号，绿色曲线为170°角光散射(HALS)检测器信号）


图2 绝对分子量、回转半径(Rg)及RI随流出时间曲线

（紫色曲线为示差(RI)检测器信号，绿色曲线为绝对分子量，蓝色为回转半径(Rg)随流出时间曲线）



图3  分子量分布和累积分布曲线

（黄色曲线为分子量分布曲线，紫红色曲线为累积分布曲线）


03

  总结  

GPC与多角度光散射检测器联用在测定聚合物绝对分子量及其分布上具有其独特优势，不需要用标准物质作校准曲线，具有较高的准确性和精密度，且操作简单，可实现连续测定。

本文采用GPC/MALS方法，使用TSKgel G5000PWXL+G6000PWXL色谱柱成功对透明质酸钠的绝对分子量、分子量分布及回转半径进行了测定。该方法可用于透明质酸钠的质量控制和应用研究。




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