应用案例 | 以 mRNA 疫苗为例，脂质制剂质控，单个样品仅需 4 分钟！

在人类迎战新型冠状病毒肺炎 (Corona Virus Disease 2019, COVID-19) 疫情中，mRNA 疫苗的作用毋庸置疑，它有效预防和控制了病毒传播。

mRNA 疫苗具有研发周期短、免疫原性强、对病原体变异反应迅速和易于批量生产等诸多优点。但在研发过程中，它也存在着业内众所周知的两大技术难点：一是分子设计，二是递送系统。

目前普遍采用脂质纳米粒 (LNP) 封装 mRNA 疫苗的脆弱分子。LNP 封装递送靶向性强、包封率高、细胞亲和性好，可以防止 mRNA 疫苗的脆弱分子在到达作用靶标之前被消化或切碎。

※ 本文所展示的案例是通过高效薄层色谱技术 (HPTLC)，对脂质制剂配方组成进行快速、简便和稳健的高通量分析检测，可广泛应用于脂质制剂的配方筛选以及质量控制等研究。

阳离子脂质体可与 mRNA 形成复合物，从而有效进入细胞进行转染。通常的阳离子脂质体处方中需含有阳离子脂质、胆固醇、中性助磷脂以及 PEG 化磷脂等。

案例中选择了 DOPS、DOPE、DOTAP 等常用的辅助脂质和阳离子脂质作为对照品，来分析检测脂质制剂配方的成分组成。

以 mRNA 疫苗制剂中脂质成分的分析为例，HPTLC 分析色谱图结果如下所示：

注：样品从左至右依次为 DOPS (二油酰基磷脂酰丝氨酸)，lyso-DOPE (溶血-二油酰磷脂酰乙醇胺)，DOTAP (溴化三甲基-2, 3-二油酰氧基丙基铵)，DOPE (二油酰磷脂酰乙醇胺)，DOTMA (氯化三甲基-2, 3-二油烯氧基丙基铵)，DODMA (1,2-二油醇-3-二甲基氨基-丙烷)，油酸，胆固醇

应用上述色谱条件对未知组成的制剂样品进行 HPTLC 分离，可根据色谱结果推测制剂配方组成。

轨道1：混合对照品，按照RF值递增顺序依次为 DOPS、DOPE、DODMA、胆固醇；

轨道2：脂质体溶液；

轨道3：脂质体制剂。

高效薄层色谱技术 (HPTLC) 优势

● HPTLC 分析对样品前处理要求低，薄层板一次性使用无污染风险，开放式色谱可自由衍生使脂质检测变得简单且可视化。

● HPTLC PRO 分析 5 板约 4.5 小时，单个样品分析平均耗时约 3.6 分钟。

● ADC 2 分析 5 板约 7.5 小时，单个样品分析平均耗时约 6 分钟。

CAMAG HPTLC PRO

从以上分析，利用 CAMAG 首创的 HPTLC PRO 全自动色谱系统更能全面提升效率，实现全程无人干预的自动化连续多板之 “点样 – 展开 – 衍生 – 检测 – 分析 – 报告” 操作流程，解决色谱重现性问题瓶颈，充分发挥 HPTLC 快速、直观、自由衍生的技术优势，尤其适用于复杂成分样品的分离及检测。

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