通过GPC凝胶净化色谱仪测定坚果里的八种苯甲酰脲类农药

如何从含较高脂肪的坚果中提取疏水性农药，并保证其回收率和低水平的检出限，具有一定的挑战性。本文介绍了一种简单、快速的测定坚果类样品中的八种苯甲酰脲类农药的方法，通过凝胶净化色谱仪（GPC），加上高效液相色谱-串联质谱（LC–MS/MS）分析检测。这种方法没有观察到明显的基质效应。八种物质的校准曲线在10~500μg kg−1范围内线性良好，相关系数超过0.9990。同时，对于实际样品：核桃、巴旦木和甜杏仁，采用GPC净化，回收率均在82.8和113.2%，相对标准偏差小于11%。定量限为1.8～9.7μg kg−1。实践证明，该方法可以用于脂肪含量高的食品样品中八种苯甲酰脲类农药同时测定。

关键词：

苯甲酰脲类农药、高脂肪食品样品、凝胶净化色谱仪（GPC）

试剂：

色谱纯级的：甲醇、乙腈、乙酸乙酯、丙酮、环己烷、甲酸、乙酸、正己烷；

分析纯级的：无水硫酸镁和氯化钠

SPE柱：PSA和C18

八种苯甲酰脲类农药混标（氟铃脲，氟啶脲，除虫脲，氟虫脲，氟苯脲，杀铃脲，灭幼脲，敌草胺，100ug/ml）

母液：取1ml混标，用甲醇稀释至100ml.

标准曲线：用乙腈配置，浓度梯度为：10.0，20.0，50.0，100.0，200.0,和500.0ug/L

样品前处理萃取：

称取2.00g样品置于50ml带盖离心管中，加入10ml丙酮-正己烷（1：9），在涡旋混合器上充分混合，在振荡器中振荡20min。振荡完成后放置于离心机内，以8000rpm 离心5min。上清液过0.22μm滤膜，取2.5ml过滤后的上清液与试管中，用氮吹浓缩仪浓缩至干。

GPC净化：

GPC净化设备采用J2 Scientific AccuPrep MPS GPC Cleanup System,GPC填料为Bio-Beads S-X3 Express column，流动相是乙酸乙酯:环己烷（1:1,v/v）,流速为5ml/min。样品用10ml乙酸乙酯：环己烷复溶，进样量为5ml,收集时间为9.0~25.0min，收集液用旋转蒸发仪蒸干，加入500ul乙腈，用涡旋混合器充分复溶，之后进入LC-MS/MS进行检测。

液相条件：

采用ekspert™ ultraLC 110 series 的超高效液相色谱系统

质谱条件：

QTRAP 6500 三重四极杆-线性离子阱复合质谱系统

表一：采集方法参数

回收率比对（相比于SPE方法）

表2 不同净化方式的回收率（n=3）

通过都不同净化方式的对比可以看出，采用SPE方法的回收率均小于70%，但是使用GPC净化，回收率均在86%以上，所以针对含较高脂肪样品的净化方式，优选GPC净化。

表3 不同样品、不同加标浓度下的加标回收率及相对标准偏差

通过针对不同样品、不同加标浓度下的回收率及相对标准偏差的测定，回收率在82.8~113.2%之间，说明用GPC净化，对低浓度的含量，也有较好的回收效果。另外，相对标准偏差为1.4~10.8%，净化效果重复性满足要求。

检测方法性能判定

表4 八种苯甲酰脲类农药的线性范围，检出限及定量限

该检测方法，在浓度区间为10.0~500.0μg kg−1表现出良好的线性关系，定量限范围在1.8~9.7μg kg−1。

美国 J2 Scientific 公司是一家有 40 多年有机分析前处理行业经验的公司，公司坐落于 GPC 净化色谱的发源地美国密苏里州哥伦比亚。20 世纪 60 年代，David Stalling 博士发明了凝胶渗透色谱净化技术，并将首次凝胶渗透色谱净化使用在农残样品中。随后从而 Dr. Stalling 和其他人共同成立了 ABC 实验室，专注于 GPC 及样品前处理仪器的生产和研发。在 1995 年之初，ABC 实验室的 Jeff Wiseman 和 Dr.Stalling 将公司改名 J2 Scientific 公司，力争在前处理净化领域做到最专业。从早期的 AccuPrep（模块式 GPC 系统）到AccuPrepMPS（整体式 GPC 系统），再到 Accu VapTM（全自动凝胶净化在线浓缩系统）和 PrepLinc 样品前处理平台（GPC、 SPE、定量浓缩系统），美国 J2 Scientific 公司一直引领着样品前处理仪器的发展，美国 J2 Scientific公司和美国 EPA 合作开发了 EPA 3640 方法（参考 EPA 3640 方法）。自从 2000年初，北京普立泰科仪器有限公司将美国 J2 Scientific 公司前处理引进中国，众多国家级重点实验室均采用 J2 Scientific 公司前处理仪器，并推出了中国国家标准和行业标准50多项。