2021-09-20 04:16:39, 蒋玉立 徕卡显微系统(上海)贸易有限公司
直播主题
模式生物的高内涵扫描——高分辨THUNDER助力发育生物学
直播时间
9月23日(周四),14:00-15:00
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主讲人简介
蒋玉立,徕卡应用专员。
2018年毕业于中国科学院分子植物科学卓越创新中心细胞生物学专业,主要研究方向:拟南芥子叶发育与植物激素信号传导。2018年至2020年在上海交通大学生命学院做博士后,主要研究方向:CRISPR技术在植物中的改良与应用。具有多年光学显微镜操作经验,主要负责THUNDER、STED超高分辨率共聚焦、荧光寿命成像共聚焦等高端产品。
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内容简介
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发育生物学主要研究生物体从精子、卵子发生,形成受精卵,然后生长发育直至衰老、死亡的过程。由于发育是一个高度动态的过程,会涉及对研究对象时间、空间等多个维度的观察。THUNDER专利技术可以实时去除样品的非焦面的模糊信号,从而将分辨率大大提升。搭载在M205系列上的THUNDER体视镜具有分辨率高、拍摄速度快、光毒性低、变倍比高等优点,将体视镜的应用范畴从传统的样品分离、样品筛选拓展到高内涵多维度高清成像。
模式生物由于其结构简单、生活周期短、培养简单、基因组小等特点,在生物医学等领域发挥重要作用。模式生物作为材料不仅能回答生命科学研究中最基本的生物学问题,对人类一些疾病的治疗也有借鉴意义。以秀丽线虫为例,我们可以用一台THUNDER体视镜完成样品挑选、荧光表达筛选、成像与分析整个工作流程。
图1 体视THUNDER助力发育生物学–C. elegans秀丽线虫工作流程
高内涵筛选(high content screening, HCS)技术,指在保持标本结构和功能完整性的前提下,在单一实验中实现多靶点、多参数的同时检测,适用于大规模药物筛选、药理毒理实验或发育生物学研究等。高内涵系统不仅仅适用于各种各样的细胞模型,也适用于各种小型模式生物。THUNDER的量子载物台移动速度快达500mm/s,重复精度高达0.25μm,配合使用sCMOS高速相机,将大大缩短整个高内涵筛选过程。
图2 THUNDER的量子载物台:超高速,适合高内涵扫描
对样品完成显微操作与观察后,我们需要对样品进行高清成像,获得高质量的图片用于后期分析,THUNDER M205利用徕卡专利的即时光学解析技术Instant Computational Clearing在采集图像的同时去除非焦信号的干扰,无需等待就能获取高质量图像。
图3 皮质球体THUNDER体视镜高分辨图像
Virally labeled neurons (red) and astrocytes (green) in a cortical spheroid derived from human induced pluripotent stem cells. THUNDER Model Organism Imager with a 2x 0.15 NA objective at 3.4x zoom was used to produce this 425 µm Z-stack (26 positions), which is presented here as an Extended Depth of Field (EDoF) projection. Image courtesy of Dr. Fikri Birey from the Dr. Sergiu Pasca laboratory, CA (USA).
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