轻轻松松完成肽谱表征流程，您只差一根 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱

2021-08-07 15:31:59, 安捷伦科技安捷伦科技（中国）有限公司

肽谱分析和表征是生物制剂生产过程中关键质量属性 (CQA) 的重要组成部分。这些分析通常采用反相化学键合相进行，并结合质谱检测，旨在实现出色的分离度和鉴定。通常会在 UHPLC 仪器上使用填料粒径小于 2 µm 的色谱柱进行此类 CQA 分析，但这会产生较高的压力。尽管 UHPLC 系统可以适应这种高压力，但在系统的上限条件下持续运行会产生额外的成本。除了增加仪器本身的成本外，高压操作还会增加维护成本，包括仪器停机和维修费用，据估算，在低压下运行可以减少 30%–50% 的成本。

AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱

助您降低运行成本

以不到一半的运行反压实现 91% 的峰容量

两种色谱柱均采用三个水:乙腈梯度进行冲洗，并在 0.1% 甲酸和 5% 乙腈中放置四天。然后使用它们运行序列，包括两次 1 µg 抗体 aIL8 的 Lys C 酶解产物进样，接着是三次 25 种肽混标的重复进样。第三次重复测定用于数据分析（在配备 G4226A 自动进样器的 G4220A 1290 二元泵上进行）。在 Agilent 6550 四极杆飞行时间质谱仪上通过 MassHunter LC/MS 数据采集软件和 MassHunter 工作站定性分析软件 B.10 完成数据采集。使用 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱系统运行样品，流速为 0.4 mL/min，温度为 40 °C，并以 0.1% 甲酸水溶液 (A) 和 0.1% 甲酸乙腈溶液 (B) 作为流动相。梯度条件：时间–%A:%B。0 min–97:3，2 min–97:3，35 min–70:30， 40 min–3:97，43 min–0:100，43.5 min–97:3。

重现性、窄峰形和高峰容量是肽谱分析的关键质量属性。在相同的色谱柱尺寸 (2.1 × 150 mm) 条件下，两根色谱柱以 0.1% 甲酸水溶液 (A) 和 0.1% 甲酸乙腈溶液 (B) 作为流动相。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱获得的峰宽 (FWHM) 与竞品色谱柱峰宽接近，证明了它对窄峰的性能非常出色。AdvanceBio Peptide Plus 和竞品W的色谱柱在峰容量上的 91%。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱的反压不足亚 2 µm 色谱柱的一半，性能却与后者相当。

使用 AdvanceBio Peptide Plus 2.7 µm 色谱柱，您可以以不到一半的运行压力获得亚 2 微米颗粒填料技术 91% 的峰容量，此外，利用表面多孔颗粒填料技术，仍可以具备与传统亚 2 微米全多孔颗粒填料相当的柱效（FWHM ― 半峰宽）。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱在平衡压力要求和仪器操作成本的同时，可实现肽谱分析的鉴定。

安捷伦目前用于肽图/多肽分析

的几种色谱柱选择