2021-08-07 15:31:59, 安捷伦科技 安捷伦科技(中国)有限公司
肽谱分析和表征是生物制剂生产过程中关键质量属性 (CQA) 的重要组成部分。这些分析通常采用反相化学键合相进行,并结合质谱检测,旨在实现出色的分离度和鉴定。通常会在 UHPLC 仪器上使用填料粒径小于 2 µm 的色谱柱进行此类 CQA 分析,但这会产生较高的压力。尽管 UHPLC 系统可以适应这种高压力,但在系统的上限条件下持续运行会产生额外的成本。除了增加仪器本身的成本外,高压操作还会增加维护成本,包括仪器停机和维修费用,据估算,在低压下运行可以减少 30%–50% 的成本。
AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱
助您降低运行成本
以不到一半的运行反压实现 91% 的峰容量
两种色谱柱均采用三个水:乙腈梯度进行冲洗,并在 0.1% 甲酸和 5% 乙腈中放置四天。然后使用它们运行序列,包括两次 1 µg 抗体 aIL8 的 Lys C 酶解产物进样,接着是三次 25 种肽混标的重复进样。第三次重复测定用于数据分析(在配备 G4226A 自动进样器的 G4220A 1290 二元泵 上进行)。在 Agilent 6550 四极杆飞行时间质谱仪上通过 MassHunter LC/MS 数据采集软件和 MassHunter 工作站定性分析软件 B.10 完成数据采集。使用 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相 色谱系统运行样品,流速为 0.4 mL/min,温度为 40 °C,并以 0.1% 甲酸水溶液 (A) 和 0.1% 甲酸乙腈溶液 (B) 作为流动相。梯度条件:时间–%A:%B。0 min–97:3,2 min–97:3,35 min–70:30, 40 min–3:97,43 min–0:100,43.5 min–97:3。
重现性、窄峰形和高峰容量是肽谱分析的关键质量属性。在相同的色谱柱尺寸 (2.1 × 150 mm) 条件下,两根色谱柱以 0.1% 甲酸水溶液 (A) 和 0.1% 甲酸乙腈溶液 (B) 作为流动相。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱获得的峰宽 (FWHM) 与竞品色谱柱峰宽接近,证明了它对窄峰的性能非常出色。AdvanceBio Peptide Plus 和竞品W的色谱柱在峰容量上的 91%。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱的反压不足亚 2 µm 色谱柱的一半,性能却与后者相当。
使用 AdvanceBio Peptide Plus 2.7 µm 色谱柱,您可以以不到一半的运行压力获得亚 2 微米颗粒填料技术 91% 的峰容量,此外,利用表面多孔颗粒填料技术,仍可以具备与传统亚 2 微米全多孔颗粒填料相当的柱效(FWHM ― 半峰宽)。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱在平衡压力要求和仪器操作成本的同时,可实现肽谱分析的鉴定。
安捷伦目前用于肽图/多肽分析
的几种色谱柱选择
现已上市以下配置
AdvanceBio Peptide Plus 不锈钢色谱柱
方法验证工具包
快速保护柱
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