不可忽视!色谱柱使用注意事项!

2021-03-14 15:47:30 昭和电工科学仪器(上海)有限公司


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以下这些注意事项您留意了吗?

让我们复习一下吧!

色谱柱的安装
(1) 安装色谱柱前请先将设备中的流路充分洗净,完全置换成流动相。另外,请切换阀清洗并置换进样器的流路(进样环)。置换不互溶或溶解性低的溶剂时,先使置换为双方溶剂都能互溶的溶剂,再置换成使用溶剂。
(例1)从氯仿置换成水的时候,先置换为甲醇,再置换成水。

(例2)从高浓度缓冲溶液(或盐的水溶液)置换成水/乙腈的时候,先置换为水,再置换成水/乙腈。

(2) 查看色谱柱的铭牌,然后将色谱柱连接到设备,使流动相沿流动方向(➡)流动。 使用保护柱时,请依次先连接保护柱,再连接分析柱。
(3) 请一边按住管路一边拧紧色谱柱的末端螺丝,防止管路和末端螺丝中产生空隙。空隙会造成样品的扩散,导致色谱峰变宽。
(4) 将流速设置为小于正常流速的一半,然后开始送液。 在升温使用色谱柱时,以低流送液直到达到设定温度,然后逐渐将流速增加到所需流速。

样品配制

(1) 尽量使用流动相溶解和稀释样品。 如果难以溶解在流动相中,请尽量和流动相组成接近。 对于梯度洗脱,建议使用初始流动相配制样品。
(2) 为了防止由于颗粒物(不溶物)的堵塞导致色谱柱变差,劣化或性能变差,请使用滤膜(0.45μm)过滤样品。
(3) 为了保护分析柱,建议使用保护柱。

动相配制

(1) 流动相请充分脱气防止有气泡。
(2) 流动相中含有不溶的杂质可能会导致色谱柱性能下降和色谱图噪声,因此请使用滤膜(0.45μm)过滤流动相。
(3) 确认色谱柱的储存溶剂,要置换成不互溶或溶解性低的流动相时,请使用双方溶解性好的溶剂作为过渡,然后再置换成所需流动相。
(4) 置换流
动相时,请使用通常流速一半以下的流速送液。
(5) 进行梯度洗脱时,由于流动相组成的变化,色谱柱压力可能会超过梯度洗脱过
程中的最大使用压力。 请调整流速和色谱柱温度,以免超出最大使用压力。

色谱柱清洗方法

流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内,可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化,这种情况清洗色谱柱可能有改善效果。使用保护柱时,请先去除保护柱进行检测,如果效果改善了,则可能是保护柱的原因,请清洗保护柱。
如果去除了保护柱仍然没有改善,请分别清洗保护柱和分析柱,请注意把保护柱和分析柱分开清洗。清洗色谱柱时,请不要连接检测器,流动相从色谱柱流出后直接流入废液缸即可。
(1) 如果不溶物堵在色谱柱入口,可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。
(2) 其他的清洗方法请参考各产品的使用说明书。

色谱柱的保存

置换成出厂时的储存溶剂,从装置中卸下色谱柱并拧紧两端堵头,在温度变化小的阴暗处储存。


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