反相C18 Flash色谱柱使用注意事项

经典的反相硅胶表面的图示。C-18的烷基链键合在硅胶表面，增加了硅胶的疏水性。

1. 使用前，色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂（推荐乙腈）进行活化，低流速慢慢冲洗，这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展，使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到最好状态。

2. 反相C18在使用之后，需要保存在100%有机溶剂当中（推荐乙腈），切记不可吹干后保存，压干后容易使得C18键断裂，影响柱效和后期分离效果。

3. Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中，这样会使得C18链蜷缩，进而影响柱效。因此在起始比例设置方面，一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例，请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前，色谱柱保存在有机相当中，我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例，平衡一段时间后，才可开始正式分离。

4. 一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为：3-12之间，任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。

5. 常规的两种反相C18流动相体系为：水-甲醇；水-乙腈。

6. 在使用过程中的任何时候以及后期的保存，请不要将色谱柱干掉，一定要让其沉浸在溶剂之中。

7. 流动相极性在进行转换时，跨度不宜过大，以免过度不匀，同时放热产生气泡影响分离、

8. 在色谱柱使用完成后，需使用纯有机溶剂（乙腈或者甲醇）对对色谱柱进行冲洗，保证没有样品残留，如样品为离子型，则需要用10CV以上的溶剂冲洗，确保无残留。

9. 若色谱柱处于长期闲置状态时，要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗10CV以上，最后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水，或者100%乙腈）中；

10. 色谱柱在长时间使用中，压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况，如压力增大明显，可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗，可使色谱柱恢复部分活性，提升一些柱效。

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