i-Raman EX 对荧光样品的拉曼分析

本文采用激发波长为1064nm的i-Raman EX便携式拉曼光谱仪对罗丹明6G（R6G），罗丹明B，苏丹红，结晶紫，酪蛋白等具有荧光的样品的分析，并与785nm的i-Raman的测试结果进行了比较。与785nm的i-Raman相比，1064nm的i-Raman EX能有效的消除样品的荧光得到较好的拉曼光谱。

引言

近红外激光可以消除荧光的干扰。荧光现象是一个双光子过程，需要吸收一个外来光子，然后再发射出一个荧光光子。拉曼是一个单光子散射过程，无需吸收。很多种材料的吸收带位于可见区域，只有少数材料的吸收带位于近红外区域，所以在大多数情况下，近红外激光不会引起荧光（因为吸收过程没有发生）。当样品在可见激发下有很强的荧光干扰时，使用近红外拉曼是一个很好的解决方案，可以获得优质的拉曼光谱。

以下采用i-Raman EX对各样品进行分析测试。采用光纤拉曼探头直接测量。

配置：光谱范围175-2500cm-1；光谱分辨率约9cm-1，激光功率根据测试的样品进行调节。光 纤拉曼探头长度约1.5米，反射式信号收集。通光效率约70%。

i-Raman EX拉曼光谱仪

i-Raman拉曼光谱仪

实验结果

i-Raman EX与i-Raman对染料样品测试的拉曼光谱比较

图1为罗丹明B的拉曼光谱，蓝色的光谱为激发波长为785nm的i-Raman得到的结果，红色的光谱为激发波长为1064nm的i-Raman EX 测试所得到的结果。两条光谱图比较可知，蓝色的光谱基本上是荧光，荧光将罗丹明B的拉曼信号都湮没了，而红色的光谱荧光背景较低，且拉曼信号也比较明显。实验结果说明：用1064nm的激发波长的拉曼光谱仪能有效的消除样品的荧光干扰，对于染料，有荧光的生物样品都是十分适用的。

图1.罗丹明B的拉曼光谱，蓝色（i-Raman 785nm），红色（i-Raman EX 1064nm）

用同样的方法对R6G，苏丹红和结晶紫这三种染料用i-Raman和i-Raman EX进行对比测试。R6G，苏丹红和结晶紫的拉曼光谱分别为图2，图3，和图4。从这三张图中也可以看出，用1064nm的激发波长能有效的消除样品的荧光干扰，得到较好的拉曼信号。

图2. R6G的拉曼光谱，蓝色（i-Raman 785nm），红色（i-Raman EX 1064nm）

图3. 苏丹红的拉曼光谱，蓝色（i-Raman 785nm），红色（i-Raman EX 1064nm）

图4. 结晶紫的拉曼光谱，蓝色（i-Raman 785nm），红色（i-Raman EX 1064nm）

i-Raman EX与i-Raman对生物样品酪蛋白的拉曼光谱比较

图5为酪蛋白的拉曼光谱，蓝色的光谱为785nm的i-Raman测试得到的，红色的光谱为1064nm的i-Raman EX测试得到的。同样，由图可知，用1064nm的激发波长，生物样品酪蛋白的荧光干扰明显减小，拉曼信号也增强很多。

图5. 酪蛋白的拉曼光谱，蓝色（i-Raman 785nm），红色（i-Raman EX 1064nm）

结论

用激发波长为1064nm的i-Raman EX拉曼光谱仪能够有效的消除样品的荧光对拉曼信号的干扰，因而得到较好的拉曼信号。非常适用于一些生物样品和有颜色的样品。