2020-12-09 23:43:10, Waters 沃特世科技(上海)有限公司
液质联用仪实现了色谱和质谱优势的互补,将色谱对复杂样品的高分离能力与质谱的高选择性、高灵敏度结合起来。在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛应用。
仪器污染是液质联用仪在日常工作中会遇到的常见问题。但只要做好预防工作,就可以有效降低液质联用仪出现污染问题的概率。本文将从溶剂处理、实验器材清洗等方面介绍预防污染的措施。
1
请正确选择、制备和处理溶剂
有机溶剂必须为色谱纯及以上级别,推荐使用进口品牌试剂。
注意❗:1)有机溶剂请注意制造商建议的有效期,打开溶剂瓶可能会发生污染;2)水或缓冲盐溶液要使用超纯水(18.2 MΩ)。
水溶性流动相和水易受微生物生长的影响,可能会在梯度运行中形成峰,并在等度运行中增加背景吸收。为防止流动相中生长微生物,请每天制备且过滤含水流动相并进行脱气。
为减少背景噪音,请使用最低浓度的流动相添加剂。使用的添加剂越多,引入流动相的污染就会越多。
请使用色谱纯级别以上的添加剂。同时,请使用含低浓度铁离子和其他金属离子的添加剂,例如:甲酸。请注意切勿使用可能含有大量金属离子的乙酸。最后请注意,不可使用非挥发性的添加剂等。
溶剂应储存于洁净的玻璃器皿中,并盖上溶剂瓶以防止通过空气传播的污染物进入溶剂。封盖溶剂瓶时,请使用铝箔或者系统随附的盖子。
注意❗:请勿使用Parafilm或其他塑料薄膜覆盖溶剂瓶。
2
请正确清洗实验室玻璃器皿
使用前必须彻底清洗用于制备或储存流动相的玻璃器皿。切勿使用去污剂或洗洁精清洗玻璃器皿。请先用有机溶剂冲洗玻璃器皿,再用水冲洗。
如果需要进行更彻底的清洗,可按照以下步骤操作:
依次使用10%甲酸、纯水、甲醇或乙腈进行超声处理,最后再用水进行超声处理;
再次重复此操作两次;
将用于制备或储存流动相的玻璃器皿与其他常用的玻璃器皿分开存放。
3
请正确制备和处理样品
请确保样品无颗粒。同时,在制备和处理样品的过程中必须注意不要引入污染。请使用洁净的样品瓶、瓶盖和样品板。推荐使用沃特世的进样小瓶。
4
请佩戴手套
请佩戴无颗粒物、无粉尘的非乳胶手套。如果手套变湿,应予以更换。湿手套会带入污染。
5
请使用洁净的色谱柱
UPLC或HPLC色谱柱可以捕获色谱柱头上的颗粒物、沉淀的蛋白质以及其他有机污染物。这些污染物会增加操作压力或改变色谱柱选择性,从而对色谱柱的寿命产生不良影响。此外,污染物可能缓慢排出,使残留和背景噪音增加。
色谱柱还会聚集溶剂中的杂质。这种情况会在以下条件下发生:
使用含水量较高的溶剂对反相色谱柱(例如C18色谱柱)进行长时间平衡;
使用有机试剂浓度较低的溶剂在反相色谱柱上执行等度运行。
吸收的化合物可能会洗脱为显著的峰或成为延伸在整个色谱图上的大宽峰。痕量成分的富集效果会增加溶剂或UPLC/HPLC系统中的污染物含量。
存储色谱柱时,请在柱中使用最初提供的溶剂(例如100%乙腈)进行存储。在存储之前,冲洗色谱柱,以清除缓冲剂和添加剂。
注意❗:有关色谱柱的详细保样与使用说明,请参阅色谱柱制造商提供的保样与使用说明。
6
检查实验室空气
请保持实验室空气洁净。例如实验室空气中可能存在邻苯二甲酸盐。通过空气传播的邻苯二甲酸盐来源于空调滤清器,会污染与空气接触的任何溶剂或固体。
下一期我们会为大家带来《快速排查液质联用仪器“污染问题”小技巧》,敬请期待!
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