2020-10-27 20:28:01, Waters 沃特世科技(上海)有限公司
实验实例:
图1. 装配Maxpeak HPS柱硬件的PREMIER
V.S 未装配Maxpeak HPS的其它色谱柱
同样的5款ACQUITY UPLC色谱柱填料,分别装填在使用MaxPeak HPS技术的PREMIER色谱柱(左上图)和常规不锈钢柱(右上图)中。对同一组化合物进行检测,分析检测条件完全一致,比比看,有哪些地方不一样?
答对了!峰2和3,左右对比之下有着天壤之别!那是什么造成这样的区别呢?且听小编为您解答。
实验中的6个化合物分别是:
V0:死时间标记物硫脲thiourea
1:美托洛尔metoprolol
2:氢化可的松磷酸酯hydrocortisone phosphate
3:地塞米松磷酸酯dexamethasone phosphate
4:强的波尼松prednisone
5:阿米替林amitriptyline
6:酞酸二丙酯dipropyl phthalate
实验的分析检测条件:
系统:ACQUITY UPLC H-Class+PDA检测器
进样体积:2 μL
流动相:10 mM甲酸铵pH3水溶液-乙腈梯度
流速:0.5 mL/min
色谱柱规格:2.1x50 mm UPLC柱
柱温:30度
检测波长:UV254 nm
再让我们看看这6个化合物的结构式:
图2. 6个化合物的结构式
知否知否,样品吸附是祸根!
富电化合物,如含有膦酸基、羧酸基以及去质子化胺基;
➡ 会与金属表面(例如,色谱柱的筛板、柱管等)发生非特异吸附;
➡ 从而导致峰形拖尾、变小、不重现、甚至消失……;
➡ 最终导致数据失真。
图3. 分析物因与金属相互作用造成损失
你可能听说过前辈们讨论过解决这些问题的小方法:用酸钝化、样品重复进样老化色谱柱、使用PEEK管材的色谱柱、使用钛制筛板与柱管材、流动相里添加剂等等。
但这些方法在实操中会带来更多的困挠:PEEK不耐压;钛是金属也会吸附;添加剂也可能会干扰分析、使色谱柱变性,对MS造成残留...简而言之就是耗时又费力,数据结果还可能不稳定,需重复操作,造成工作效率的降低。
沃特世MaxPeak HPS技术闪亮登场!
沃特世采用创新技术,在不锈钢管材表面形成高度交联的亚乙基桥杂化硅胶层,就像给它们穿上了BEH(Ethylene-Bridged Hybrid)的外衣!
图4. 采用MaxPeak高性能表面技术解决对金属敏感分析物的问题
正是这层“外衣”,阻隔了分析物与金属管材的结合吸附,让你的UPLC柱一目了然,不再担心有所遗漏错误。你也不再需要对色谱柱进行反复进样饱和老化,请看下图。
对寡核苷酸混标进行分析,流动相体系是25 mM醋酸己胺(pH6.0)乙腈体系,柱温60度,UV250 nm,色谱柱规格2.1x50 mm。对于不锈钢管材的常规UPLC柱,随着多次进样,分析回收率逐渐提高。而PREMIER色谱柱,从第一针开始,峰形就是这么漂亮、这么灵敏!
回到最开始的故事,对于峰2 — 氢化可的松磷酸酯,当进样量是2 ng时,两柱响应灵敏度相差5倍!查看2-200 ng范围的log-log定量校正线,PREMIER柱的检测数据真实可信度明显更高!
PREMIER色谱柱=ACQUITY UPLC柱填料+MaxPeak HPS柱硬件技术;
MaxPeak HPS,为不锈钢柱管,穿上了一层BEH”隔离服“;
让你不再担心分析物与色谱柱管材之间的非特异性吸附;
分析更安心,结果更可靠!
注意❗:
1)注意当心有富电子化合物:P(磷酸基)、N(胺基)、O(羧酸基)的检测项目!
2)注意当心有高灵敏度要求的UPLC或LCMS分析
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