2020-10-10 18:32:30 东曹(上海)生物科技有限公司
高效液相色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,出现柱效下降或伴有峰型拖尾、分叉等情况。需要定期进行清洗和再生,以保证色谱柱的柱效和使用寿命。
不同类型的色谱柱都有与之对应的清洗方法。本篇推送为大家带来TSKgel亲水性聚合物基质蛋白分离用色谱柱的清洗方法及注意事项。
TSKgel亲水性聚合物基质的蛋白分离用色谱柱,包括SuperQ-5PW, DEAE-5PW, SP-5PW, CM-5PW, DEAE-NPR, SP-NPR, BioAssist Q/S这几个型号的离子交换色谱柱,还有疏水、亲和等其他多种类型的柱子。
吸附的主要原因
此类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能团脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,在柱子长时间使用后,样品组分的洗脱情况还是会发生改变的。其原因与样品中极微量的吸附物在柱中的蓄积有关。特别是生物样品组分复杂,这种吸附现象(非特异性吸附)时有发生。
清洗方法
①.先使用0.1~0.2 mol/L氢氧化钠水溶液或20~40%的醋酸水溶液进样清洗(100 µL, 3~5针)即可冲掉色谱柱上吸附的杂质。如果采用该方法清洗后,色谱柱性能仍无法恢复,再考虑以下两种方法。
②.去除疏水性杂质:在清洗液中添加10-20 %的甲醇、乙腈等有机溶剂后过柱清洗。
③.去除难溶性蛋白:在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3 %的中性表面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂可能在柱中残留。
其他类型色谱柱的清洗及日常维护相关的内容会在今后的推送中陆续带给大家,敬请期待!如您有色谱柱使用方面的任何问题,请联系东曹技术中心:021-34610856 (227分机)
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