无菌工艺模拟灌装如何选择培养基？只需记住四大要点！

培养基模拟灌装试验（Media Fill）是指在无菌生产的工艺验证中，以一种模拟替代物质来代替实际生产介质，模拟实际产品的灌装过程，以检验无菌生产线是否达到无菌保证的水平。

2018年9月，国家药品监督管理局正式发布了《无菌工艺模拟试验指南》，作为实施《药品生产质量管理规范》（GMP）的指导性文件，于2018年10月1日起施行。

指南中指出，应结合被模拟产品的特点以及模拟介质的可过滤性、澄清度、灭菌方式等选择合适的模拟介质。不应选择明显具有抑菌性的模拟介质，以确保模拟试验结果的可信度。通常可采用的模拟介质包括促进微生物生长的培养基和安慰剂。

关于模拟灌装培养基的选择，所需考虑的因素主要有以下4个方面：

1

应基于产品剂型，选择的培养基应能够支持较广泛的微生物生长，特别对无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和真菌有良好的促生长效果。胰酪大豆胨液体培养基（TSB）是一种广谱性培养基，是无菌工艺模拟试验常用的培养基。

2

如果产品需充入惰性气体、储存在无氧条件，无菌操作在严格的厌氧环境中进行时（即氧气浓度低于0.1%）。应评估是否采用厌氧培养基，如硫乙醇酸盐液体培养基（FTM）或其他适宜的培养基。

3

用于模拟抑菌性产品的培养基，如有必要需评估抑菌性产品残存对其促生长能力及模拟试验结果的影响。

4

对于包含动物来源成分的培养基，应考虑培养基引入外源性病毒污染的风险，如BSE（可传染性海绵脑病）/ TSE（疯牛病）的风险，亦可选用植物来源的培养基。

关于培养基的除菌与灭菌,主要有除菌过滤、湿热灭菌和辐照灭菌3种方式：

1

由于培养基的特性与药液有差异，培养基除菌过滤的滤器型号可与产品使用的过滤器不同。如因颗粒或生物负载较大等原因引起除菌过滤器的堵塞时，可增加预过滤步骤。

同时，需考虑降低非无菌培养基中细菌和霉菌生长的风险，以避免微生物生长导致培养基过滤性能降低。此外除菌过滤的方式无法避免支原体污染，湿热灭菌或辐照灭菌有助于降低该潜在风险，必要时可配合除菌过滤联合使用。

2

在湿热灭菌过程中，应考虑避免受热不均匀或灭菌不充分现象，应对该灭菌方式进行风险评估和验证，亦可使用无菌干粉或液体成品培养基。

3

若使用辐照灭菌的培养基粉末，需在适宜环境下进行配制等操作。辐照灭菌过程应经验证，并在产品质量报告中体现验证中所用的菌种和剂量等信息。

为安全有效的模拟灌装而设计

模拟灌装试验时,您不必担忧培养基的有效性及验证过程,默克提供辐照灭菌的培养基,每批次进行无菌测试、促生长性能测试以及支原体检测。

颗粒化干粉培养基优越的过滤性能避免滤芯堵塞，同时三层无菌包装保证无菌工艺的洁净等级要求。

卓越的质量及稳定性

• 成分选择 : 标准TSB胰酪大豆胨液体培养基及植物源TSB蛋白胨液体培养基

• 形式灵活 : 5g及5kg颗粒化干粉，三层包装10L成品液体，或根据需求定制，经严格验证的灭菌过程

• 无支原体及BSE

• 三层包装便于转移至重要洁净区域

• 优于EP，USP标准的促生长性能

提供可信赖的模拟灌装培养基

安全优先

培养基质量问题是导致模拟灌装错误结果的一个主要原因。默克高质量的培养基完善的验证过程，减少在无菌工艺模拟过程中培养基相关风险，恰当的灭菌过程确保去除细菌、酵母、真菌、芽孢以及支原体。

•伽玛射线辐照灭菌

•低粉尘降低污染      

•高溶解度，优异的过滤性能

•三层包装便于转移至重要洁净区域

•三层包装防止气体渗透

•直接无菌连接至生产管路或系统

•符合国际质量标准-BSE无忧

•默克的植物源和动物源的培养基，每批次的生产及检测都符合最严格的国际标准。为了保证安全，所有牛源性成分都选择OIE分类为无风险国家的原料。

•EU指导原则（EMA/410/01 Rev.03）旨在将药物产品引发的动物性脑病风险降至最低

•USDA对无菌工艺产品验证的相关标准

•所有牛源蛋白胨培养基符合EU指令以控制动物源产品BSE风险最小化

•针对每种培养基提供详尽的文件，助您完成无菌工艺模拟试验重要培养基准备验证阶段，更简化您的审计步骤。

•BSE/TSE证书动物源物料的可追踪，符合相关要求

•供应商质量协议保证我们的产品质量稳定性

•CoA分析证书包含每批次产品的质量控制检测结果等信息

培养基主要成分蛋白胨主要来源于酪蛋白，动物组织，这些原料可能存在疯牛病风险。为了降低风险，在生产疫苗、非口服药品以及无菌检查中，药典推荐使用低传染性或者非动物来源的原料。

Merck培养基所有成分都来自于的低传染性原料。特别是牛来源原料，都来自于疯牛病风险最低国家澳大利亚和新西兰。

培养基生产不是无菌生产而且本身的生物成分可能有助于微生物污染。支原体最小原核细胞，多形性，可以通过0.2um滤器，即使浓度达到107-108cfu/ml,也不会改变PH值或导致培养基浑浊。有效避免培养基污染和消除操作污染的办法是对培养基产品进行射线灭菌。

接种小于100CFU测试菌金黄色葡萄球菌，枯草杆菌，白色念珠菌，假单单胞菌，黑曲霉等或环境分离菌，按照适宜温度时间培养，明显生长。Merck培养基测试以下项目：