敲黑板，在家学知识点了！培养基对主动式空气采样到底有多重要？

ISO 14698-1描述了在洁净室和相关受控环境中控制生物污染的标准方法。为确保药品生产过程的安全性和稳定性，必须在相关区域内控制生物污染。其中，ISO 14698第1部分规定了监测洁净室风险区的统一方法和与风险程度相应的控制措施。

其附录A描述了如何控制空气生物污染。对于主动式空气采样，建议使用撞击、冲击或滤膜采样器。附录B介绍了如何确定空气采样器采集效率的方法指南，其指南要求主要包含两个方面的内容，即物理效率和生物效率。对于生物效率，建议使用胰酪大豆胨琼脂培养基。由于使用微生物进行验证，因此培养基的成份和质量也会影响结果。

MAS-100®系列空气采样器为基于安德森撞击原理的筛孔式撞击系统。使用90-100mm琼脂培养基平板，易于操作和维护，采取适当的采样速率、撞击速度，以达到空气采集的准确性和有效性。

所有MAS-100®系列空气采样器均已通过ISO 14698-1验证。使用胰酪大豆胨琼脂培养基TSA-ICR进行确认。如表1所示，所有MAS-100®系列仪器均显示出可靠的生物和物理效率结果。默克可以提供含有种类丰富中和剂的和不含中和剂的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA–ICR），如表2所示。

表1. MAS-100®系列空气采样器的物理和生物效率

表2. 胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA - ICR）的成份

为研究培养基的成份和质量对主动式空气采样结果的影响，我们通过以下多组测试证明默克的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA–ICR）的生长特性满足ISO 14698-1中对生物效率的要求，并表现出更好的回收率结果；与竞争产品相比，默克培养基的回收率更高。

表3.培养基

在测试室中，将四台MAS-100VF®仪器放在两张桌子上。在整个试验中，每个采样器分别位于特定位置（参见图1）。通过位置选择，实现房间内相对于墙壁、通风入口/出口等的对称性，并确保各个采样器之间保持合适的距离。

图1.

关于主动式空气采样的采样方案。在洁净室外的非受控环境中，将四台MAS-100VF®仪器放在两张桌子上的不同位置。

在两个试验中，以特定顺序测试琼脂培养基平板（参见表4）。每个采样步骤都包括3分钟的延迟和10分钟（等于1 m3）的采样步骤。采样后，将所有培养基平板置于32.5°C（±2.5）下培养2天。所有带锁扣的培养基平板均在锁定位置培养，默克的培养基平板在“关闭”位置培养。培养后，对所有可见菌落进行计数。

表4.采样顺序

A、B和C代表所使用的不同琼脂培养基平板。

记录每个培养基平板的菌落计数，并使用Minitab 17软件通过ANOVA（通用线性模型，菌落数CFU与运行循环、采样位置和培养基的对比）对结果进行分析。表5列出了每种培养基平板每次运行的平均回收率（1m3）。

表5

对这3种培养基的差异分析得到的P值为91.9％，表明默克的这3种培养基的回收率之间无显著性差异。

为了对胰酪大豆胨琼脂培养基（含卵磷脂、聚山梨酯80、组氨酸和硫代硫酸钠）TSA + LTHTh与竞争产品培养基进行比较，采用相同方式对结果进行分析。表6列出了每种培养基平板每次运行的平均回收率（1m3）。

表6

对这3种培养基的差异分析得到的P值为0.0%，表明这3种培养基的回收率之间存在非常显著的差异。为进一步对比胰酪大豆胨琼脂培养基（含卵磷脂、聚山梨酯80、组氨酸和硫代硫酸钠）TSA + LTHTh与每种竞争产品的回收率，我们采用Student’s T-检验（单侧检验，假设方差相等）对结果进行两两比较。

竞争产品A的回收率显著低于默克TSA + LTHTh

（t = 3.63，P = 0.07％）

竞争产品B的回收率低于默克TSA + LTHTh

（t = 1.92，P = 3.4％）