2020-03-15 10:01:10, Pu Heng & Wu JW Cytiva(思拓凡)
“抗原抗体”之间的相互作用无论在时下最为火热的制药行业,还是体外诊断试剂开发,甚至包括基础科研中都是最为关注和重要的。从杂交瘤上清筛选、动力学高分辨表征、一致性分析,到抗原表位作图、抗体亚型鉴定,免疫原性、生产质控、批次放行等,Biacore已经贯穿“抗原抗体”能够涉及到的相互作用范畴全部。
相较于常规检测方法,“捕获法”的出现大大简化实验流程,同时降低实验成本。其原理正是利用了捕获分子与配体之间高亲和的特性,从而实现对配体定向捕获。如下图所示:
当配体纯度低、稳定性差、共价结合活性易丧失、蛋白等电点偏酸性或实验过程中再生十分困难时,那么“捕获法”将会成为您最佳选择。“捕获法”相较于常规配体偶联方式,最大好处在于以下几点:
操作简便,无须方法开发。
检测速度快,5分钟完成一个样。
杂交瘤细胞上清等粗样品可直接上样,无需纯化。
再生条件通常已知,芯片可再生后反复使用、运行成本低。
此类捕获芯片可反复使用上千次,客户实际检测数据最为直观:使用同一张捕获芯片反复捕获抗体一百次后,CV值仅为0.5%。也就是说,该类芯片实际重复使用次数远远大于100次,而单次实验成本将低至您想不到。
正是因为Biacore的优异表现,罗氏诊断对诊断抗体的筛选也是利用了“捕获法”:兔子腹水直接上样,一次性完成130个单抗的筛选,并结合Biacore强大的功能做Ranking得到了最好的Top5目的抗体。
其实“捕获法”不仅仅适用于“抗原抗体”检测,常见蛋白经常会带有His、GST纯化标签,甚至生物素化的样品越来越多,后续我们会针对不同的样品、不同的标签分子推出不同的捕获方法SOP, 敬请期待!
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