2019-12-26 01:51:17, Waters 沃特世科技(上海)有限公司
在药物分析中,色谱图出现鬼峰是经常会碰到的问题之一。鬼峰的来源有很多,如流动相、样品瓶、残留等。偶然出现的鬼峰,通常很难排查。本文将结合实例为您介绍如何排查可重现鬼峰的来源。
当出现鬼峰时,首先可通过Empower软件中“进直接样品(Inject Immediate Samples)”或“进直接标准样品(Inject Immediate Standards)”功能(见图一),检查污染是否来自进样系统。该功能无进样动作,仅是记录当前色谱条件下的流动相基线。结合进样0 μL(有进样动作),可排查鬼峰可能来源,见图二。
图一
图二
若是样品污染,可分别考察是稀释剂原因还是样品在样品瓶中放置时发生降解。对于前者,新配稀释剂即可;对于后者,要考察样品在不同稀释剂及不同材质样品瓶中的稳定性。尤其是样品瓶材质,样品溶液长期放置时可能会导致样品降解。
图三. 样品在样品瓶中放置时发生降解 (摘自Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 140 (2017) 281–286)
若是系统污染,建议更换对样品溶解性更好的洗针液(Needle Wash),沃特世仪器通常使用90%甲醇或乙腈的水溶液作为洗针液。
若是流动相污染,可根据如下思路排查鬼峰是来自流动相中的缓冲盐、添加剂、水还是有机溶剂?在此也提醒大家,当使用小颗粒色谱柱时,一定注意使用试剂的品质,其品质好坏对色谱柱寿命将直接产生影响。
若是色谱柱污染,建议结合色谱条件及样品性质,调整色谱柱清洗方法。若分析方法中最高比例有机相偏低(如仅到40%),建议每隔30-40针左右即梯度冲洗色谱柱。
但一定要注意使用试剂的品质。如图四,客户反馈新色谱柱使用有干扰鬼峰。沃特世实验室检查发现,连续运行三针乙腈/水空白梯度,高比例有机相下的杂质峰明显减少,这表明之前使用的试剂中可能含有较多杂质,并会累积在柱内。
图四
综上,当分析过程中碰到鬼峰时,可结合Empower软件功能,逐步排查鬼峰来源,只有找到其根源才能将其彻底消除。
往期回顾
05-08 圈内人都会关注
节庆喧嚣渐远,在皖仪“劳动与奉献”赞歌正亮!05-07 WAYEAL皖仪
这不是玄学,来试试不挑质谱的高深度血浆蛋白质组学!05-07 莲莲看
一文读懂|全球首款自复制RNA(saRNA)疫苗ARCT-154背后的专利05-07 耀海生物
【聚焦光谱】请看:一机多用,服务于两个不同光学实验!05-07 聚焦光电前沿领域
网络讲座复播视频:原子力显微镜缺陷检测的相关应用05-07 Park原子力显微镜
食品安全国家标准 | 食品中氯酸盐和高氯酸盐的的测定05-07 安捷伦科技
解构生物大分子 | 安捷伦与您相约全国生物医药色谱质谱及相关技术学术交流会05-07 安捷伦科技
【液体吸光度测量】典型配置、硬件说明、软件操作05-07
【会议预告】杭州大微与您相约第五届乳制品检测与控制技术交流会05-06 DW
【获奖名单公布】高纯度细胞色素C纯化工艺方案05-06 分离纯化部
珂睿邀您共同关注食品安全国家新标准方法解读!速来预约→05-06
展会邀请|天瑞仪器邀您莅临2024 CPCA SHOW国际电子电路(上海)展览会05-06
新芝生物2024渠道商交流会首站(杭州)圆满成功05-06 SCIENTZ
报名开始丨 EDS&EBSD高级应用培训班(北京站)05-06
QbD理念在工艺和杂质控制策略制定中的应用05-06 ACD/Labs
【百特小课堂】什么叫标准物质的不确定度05-06
中国第一,全球第五!丹东百特上榜“世界工业新闻”年度报告05-06
全国最大的电池展在重庆开幕,丹东百特豪华阵容参展05-06 丹东百特
BT-1001智能粉体特性测试仪05-06