还在把大量时间扔给 N-糖前处理嘛?听说最顶尖的实验室都用它

2019-12-04 15:23:02, 安捷伦 CSD 团队 安捷伦科技(中国)有限公司


生物治疗蛋白质是一类高度复杂的分子,在生产过程中需要借助准确而稳定的分析检测方法进行分析。糖基化是一种重要的翻译后修饰,因为这些糖分子在蛋白质识别和生物治疗药物疗效方面起着关键作用。通常单抗及衍生蛋白制品采用哺乳动物细胞系,但糖基化途径非常复杂,而且并非所有克隆都能产生必需的糖谱。监管机构认为这是一项重大挑战,并就如何确定糖指纹谱提供了指导,包括使用特定的酶 PNGase F 切割 N 连接糖链,标记它们以提高检测灵敏度,然后使用 HILIC 色谱柱(通常与荧光检测器结合使用,但也可使用质谱)将它们分离。
不只是实验难度高,如果采用传统的 2-AB 手动进行去糖基化和标记反应,N-糖样品制备可能需要 1-2 天,非常耗时!这导致实验操作者把大量的时间都扔给了切糖与标记。
图为 N-糖样品制备历程
听说最顶尖的实验室
把耗时 2 天的切糖工作缩短至1- 2 小时
答案是因为他们选用了 Gly-X 平台!
ProZyme 最近发布的 Gly-X 平台将还原胺化染料(2-AB,APTS)的制备时间进一步缩短至 2 小时。对于同类最佳的 InstantPC 标记产品,其制备时间缩短至不到 1 小时。可以实现:
  • 5 分钟溶液内去糖基化
  • 1 分钟 Instant 标记
  • 快速真空板净化
  • 模块化形式,提供 24 位和 96 位配置

图为 Gly-X N-糖样品制备技术展示
InstantPC 标记具有无可比拟的荧光亮度,叔胺可生成高 MS 信号,灵敏度高,所需样品量少。
图为标记试剂荧光和质谱响应对比
如果使用具有 MS 信号更高的的 InstantPC 试剂,您 FLD 谱图中的峰几乎都可以在 BPC 中找到对应峰。
图为 InstantPC 标记 N-糖的荧光与质谱对应图谱
同时购买种类丰富的 InstantPC 标记的 N-糖文库和标准品,方便您快速定性糖型。
安捷伦为生物制药实验的全流程
提供最合适的配置

安捷伦正在更多地关注生物制药领域整个工作流程以及成功所需的要素,为您的实验室提供最合适的配置及分析方法。

您可以选 AdvanceBio 糖谱柱(AdvanceBio 糖谱分析 300Å,2.1 x 150 mm, 1.8 µm,部件号:859700-913;用于快速筛选的 AdvanceBio 糖谱分析 120Å,2.1 x 100 mm, 2.7 µm,部件号:685775-913)和 1260/1290 Infinity LC 来分离游离 N-糖,还可以利用 FLD 和 6500 系列 QTOF 帮助您更好地完成检测和数据分析,为您提供完美的实验结果。
如果您对 ProZyme 以及文中所提到的产品感兴趣,欢迎您拨打安捷伦官方咨询热线:
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