SPE应用 - 乳化脂肪制品中苯并(a)芘的测定反相高效液相色谱法

“苯并(a) 芘”是一种多环芳香族碳氢化合物，对人类基因有害，并会致癌。目前，我国对常见食物中苯并芘的限量标准为：肉制品、粮食的食品卫生标准为5μg/kg 以下，植物油为10μg/kg 以下，熏烤动物性食品为5μg/kg 以下。

GB 5009.27—2011 食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测定中，采用去活的氧化铝层析柱进行油脂中苯并（a）芘测定的前处理，使用溶剂多， 耗时长，方法较繁琐。

本方法采用上海安谱科学仪器有限公司开发的BAP苯并(a) 芘专用SPE小柱，克服了国标方法的缺点。

方法特点

● 方法简单快速，不需要进行复杂的活度调节和活性测试，整个操作时间不超过1h。

● 耗费溶剂少,仅为GB 5009.27—2011的1/3。

● 去油效果佳，能有效去除油酯等干扰。

● 有较高的回收率和稳定性。

● 适用于脂肪和乳化脂肪制品等的检测。

一．样品前处理

取1g试样，加入4mL正己烷提取，旋涡混合震荡10s，超声15min，4000 rpm离心5min。转移上清液，再加入4mL正己烷重复提取操作一次。合并两次上清液，待净化。

SPE操作过程：

（1）活化：依次用5ml二氯甲烷，5mL正己烷活化小柱(SBEQ-CA4854)。

（2）上样：将待净化液上样到小柱上，然后再用2mL正己烷润洗样品瓶，然后也上样到柱上。

（3）淋洗：用6ml正己烷淋洗小柱。

（4）洗脱：6ml二氯甲烷，并收集。

（5）浓缩定容：将收集液在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，超声1min，再漩涡混合10s,过0.22um亲水PTFE针式滤器(SCAA-114)，待上机检测。

二．液相色谱法

色谱条件：

色谱柱：Athena C18-WP 液相色谱柱 4.6*150mm，5um

流动相：乙腈：水 (95:5，v/ v)

流速：1.0mL/min；

荧光检测器：激发波长384nm，发射波长406nm

柱温：35℃

进样量：10μL；

三．实验谱图

图1 奶油空白基质谱图

图2 10 ppb苯并（a）芘标准溶液谱图

图3 奶油基质加标10ppb谱图

四．实验数据

表1 奶油、黄油基质加标10ppb苯并（a）芘回收率

五．实验中所用耗材