2019-02-19 17:55:51
近几年,媒体经常会曝光一些奶粉品牌中黄曲霉毒素超标的事件,据说它的毒性比砒霜大68倍,目前已经引起了大家的普遍关注。由于新生儿童免疫系统不完善,抵抗力较弱,所以婴幼儿食品尤其是奶粉、牛奶中黄曲霉毒素的检测尤为重要。
那么问题来了,黄曲霉毒素是什么,毒性怎样?有没有相关的检测解决方案呢?
下面迪马科技的技术人员将为您解读黄曲霉毒素及相关检测解决方案,大家快来分享吧!
一、解读黄曲霉毒素;
二、解决方案:
Ⅰ:乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的测定;
Ⅱ:乳制品中黄曲霉毒素M1的测定。
一、解读黄曲霉毒素
黄曲霉毒素的毒性及乳制品中来源
1、关于黄曲霉毒素的毒性
1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。
黄曲霉毒素(Aflatoxins)有十多种,已分离鉴定出12种包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。它主要存在于土壤、动植物、各种坚果中,特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品,是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。
2、乳制品中为什么会有黄曲霉毒素呢?
在牧场中,黄曲霉素主要来源于饲料如玉米、棉籽、草料等,如果堆放时间过长,遇到潮热的环境就容易发生霉变,产生黄曲霉素B1,而奶牛吃了问题饲料后会将大部分的B1毒素排出体外,少量B1会在体内积淀,进入血液循环后在奶汁中出现,这时的黄曲霉素就是毒性较小的M1了。
迪马科技作为全球领先的色谱消耗品制造商,一直致力于为分析检测工作保驾护航。
针对黄曲霉毒素免疫亲和柱法使用繁琐、价格昂贵、储存条件苛刻、保存期短等问题,迪马科技开发出新型、快速、低成本的ProElut固相萃取方法。
详细方案如下:
二、解决方案
Ⅰ:乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的测定;
Ⅱ:乳制品中黄曲霉毒素M1的测定。
1、适用范围
适用于牛奶、奶粉等乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。
2、提取
2.1
牛奶、原料乳等液态奶制品
称2 g样品,加2 mL乙腈,涡旋混合1 min;再加4 mL乙腈,涡旋混合1 min,4,000 rpm离心5 min;取上清液4 mL,作为上样液待净化。
2.2
奶粉等固体奶制品
称2 g样品,加5 mL水,涡旋混合2 min,样品与水充分混合均匀;加5 mL乙腈,涡旋混合1 min;再加10 mL乙腈,涡旋混合1 min,4000 rpm离心5 min;取上清液5 mL,作为上样液待净化。
3、净化
实验用到的固相萃取小柱规格:ProElut AFT 1.5g/12mL (Cat.#65904)
a活化: 10 mL乙腈,流出液弃去;
b上样: 将上样液加入柱中(流速控制每滴/两秒),接收流出液;
c洗脱: 10 mL乙腈洗脱(流速控制每滴/两秒),收集流出液,合并步骤b、c流出液;
d重新溶解:在40 ℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2 mL,向旋蒸瓶中加入5 mL无水乙醇,继续减压蒸馏完全干燥;
e衍生(方案Ⅱ不用衍生): 依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸,旋好玻璃塞充分混匀衍生液,45 ℃静置10 min。然后挥干衍生液,用10%乙腈水定容至0.5 mL。
4、色谱条件
方案Ⅰ(B1、B2、G1、G2、M1的测定):
方案Ⅱ(M1的测定):
5、添加回收结果及相关HPLC图
方案Ⅰ(B1、B2、G1、G2、M1的测定):
Ⅰ-1
乳制品中5种黄曲霉毒素添加回收结果
Ⅰ-2
5种黄曲霉毒素标准品的HPLC图
方案Ⅱ(M1的测定):
Ⅱ-1
乳制品中黄曲霉毒素M1的添加回收结果
Ⅱ-2
黄曲霉毒素M1的HPLC图
a、黄曲霉毒素M1标准品的HPLC图:
b、乳制品中黄曲霉毒素M1加标及空白HPLC图:
6、小结
以上是迪马科技开发出的新型、快速、低成本的ProElut固相萃取方法。该方法可实现与免疫亲和柱法相当的高精度回收率结果,但使用成本却大大降低。
ProElut固相萃取法单个样品的检测成本为免疫亲和柱法的1/4,酶联免疫法的1/2,同时ProElut固相萃取法简单易操作、不需要专用的大型设备、对操作人员要求不高,特别适用于各种食品生产企业及检测机构,将大大降低黄曲霉毒素的检测成本。
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