2024-05-23 12:40:35, 小 M 上海皓元生物医药科技有限公司
实验没思路,小 M 来相伴! 小伙伴们,我又来啦~今天小M 带大家一起来了解外泌体! 外泌体 (Exosome) 是直径约为 30-150 nm 的细胞外囊泡,具有脂质双分子层结构。外泌体参与细胞之间的交流和物质的运输,还与疾病的产生有关。
主题直播
细胞在正常及病理状态下分泌外泌体,封装的 DNA、RNA、脂质、代谢物以及蛋白质作为生理和病理信息传递给受体细胞,参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等方面。那么外泌体的各种分离方法有什么优缺点?外泌体如何结合不同的组学技术探究相关分子机制?
5 月 28 日 14:00 MCE 主题直播间,小 M 将详细介绍外泌体的分离方法、表征鉴定和示踪技术,并对当前外泌体在疾病机制中的课题思路进行概述。更多精彩分享,尽在直播间~
直播预约
【
精彩抢先看!
▐ 外泌体的分离技术外泌体来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体含有丰富的内含物 (包括核酸、蛋白和脂质等),参与细胞间的分子传递。外泌体常见的分离方法有:超速离心法、密度梯度离心法、色谱法、免疫分离法、超滤法和聚合物沉淀法。
图 1. 外泌体的生物标记物和内容物[1]。
▐ 外泌体的表征鉴定
分离富集之后,我们又该如何鉴定提取出来的物质是外泌体呢?根据国际细胞外囊泡研究协会 (ISEV) 提出的 MISEV 2018 指南,外泌体鉴定包含 3 个标志:透射电镜、粒径和蛋白标志物。透射电镜鉴定外泌体形态;粒径分析鉴定外泌体大小,蛋白标志物则通常通过 Western Blot 鉴定。
▐ 荧光成像外泌体示踪技术
亲脂性染料能够对外泌体进行标记,亲脂性染料主要包括两类,一是 PKH67 (绿色) 和 PKH26 (红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。二是 DiL(橙色荧光)、DiO (绿色荧光)、DiD (红色荧光)、DiR (深红色荧光)。其中 DiR 的红外荧光可穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
图 2. MNNG/HOS 和 U-2OS 细胞摄取 PKH 标记的外泌体实验[2]。
好礼享不停~
[1] Hade MD, Suire CN, Suo Z. Mesenchymal stem cell-derived exosomes: Applications in regenerative medicine. Cells. 2021 Aug 1;10(8):1959.
[2] Yang H, He C, Feng Y, Jin J. Exosome‑delivered miR‑486‑3p inhibits the progression of osteosarcoma via sponging CircKEAP1/MARCH1 axis components. Oncol Lett. 2023 Nov 16;27(1):24.
◆ 外泌体: 国自然热点中的 "常青树" !!! ◆ 外泌体,顶刊新宠丨一文 get 研究套路! ◆ 外泌体 (下):癌症诊断和靶向治疗的“遍地开花” ◆ 外泌体(上):“小废柴”到“大明星”的逆袭
06-13 沃特世
时代印记,可靠之选 | Alliance HPLC经典二十八载06-13 沃特世
沃特世发布全新代谢组学和脂质组学软件06-13 沃特世
【快讯】探索无界,加速转化 | 2024“科学空间”系列前沿对话峰会之“探索与转化的加速可及”在沪成功举办06-13
后节手术: 利用术中OCT技术的好处06-13 徕卡显微系统
徕卡精准空间生物学解决方案 第二弹06-13 童昕
快速、可靠的清洁度分析解决方案06-13 徕卡显微系统
以完整的深度揭开生命的奥秘06-13 徕卡显微系统
药包材新公示首个LCMSMS法,揭秘金属涂层中“隐形杀手”双酚A06-13 分析中心
特色应用(二) | SPME-GC-MS/MS研究不同储藏年份玉米风味物质差异06-13 创新中心
岛津连续八年入选“健康经营优良法人 ~White500~”06-13 企划部
共创美好记忆 --记2024年岛津上海分公司家庭日活动06-13 岛津上海工会
岛津招聘 | 风险合规专员06-13 人事部
质谱成像大讲堂丨如何获得一张完美的组织切片?06-13 分析中心
labtech2024 正式启幕丨4大主题洞察实验室用户需求,你的议题你做主!06-13 labtech
仪器行业新机遇:全国推动大规模设备更新!06-13 Sielin
TESCAN TENSOR 4D-STEM 客户案例研讨会06-13 TESCAN中国
有奖 | 标乐面向全球征集微观结构美图06-13 标乐中国
连续流快速原子荧光技术的开创者06-13
应用视频分享|低场核磁共振技术在小动物成像中的应用06-12 纽迈分析