【阿拉丁】链霉亲和素微珠：蛋白 & 核酸多类洗脱实操技巧

链霉亲和素与生物素具备极强的非共价结合能力，这也让从链霉亲和素微珠上洗脱生物素化分子成了实验里的 “硬骨头”。阿拉丁梳理蛋白与核酸的常用洗脱策略，按需取用不踩坑。

🧬 生物素化蛋白质怎么洗？

1、酶促消化

切断生物素标签与蛋白之间的连接臂，可释放全长活性蛋白，适合各类蛋白功能实验；

若使用非特异性蛋白酶，蛋白会被水解为短肽，多用于质谱蛋白鉴定。

2、酸性缓冲液洗脱

选用 6 M 盐酸胍、甘氨酸 - HCl 缓冲液等极端酸性体系破坏亲和结合。

⚠️ 关键提醒：强酸极易造成蛋白变性失活，洗脱完成后务必立刻用 Tris 缓冲液中和 pH，操作越快越好！

3、表面活性剂 + 加热双方案

强变性方案：SDS 上样缓冲液煮沸，洗脱后可直接上样电泳，缺点是链霉亲和素会脱落，微珠只能一次性使用；

温和优化配方：0.4% SDS、1% IGEPAL-CA630、25 mM 生物素混合，95℃加热 5 min，仅洗脱目标蛋白，链霉亲和素留在微珠上且保留活性，微珠可重复利用，适配低丰度蛋白检测。

🧪 生物素化核酸怎么洗？

1、纯水高温洗脱（＞70℃）

不会损伤 DNA 碱基，是温和优选；但缓冲盐、各类缓冲组分都会大幅降低洗脱效率，实验前需提前置换纯水。高温会解开核酸双链，测序类实验不受影响。

2、碱性缓冲液加热

氢氧化铵洗脱效率高，但强碱会破坏 DNA 碱基结构，若无特殊实验需求，常规核酸实验不推荐使用。

3、酚 / 氯仿有机溶剂萃取

可完整保留核酸天然碱基配对构象，生物素基团活性不受影响；但处理过程中链霉亲和素会变性，微珠无法重复使用，适合对核酸完整构象有要求的实验。

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