标准更新 | 大米中春雷霉素、井冈霉素、宁南霉素、多抗霉素的测定(GB 23200.125-2026)

Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；

色谱柱：Shim-pack GIST Amide（2.1×100mm，3μm；P/N：227-30818-04)；

固相萃取小柱：SHIMSEN Styra HLB 500mg/6mL（P/N: 380-00855-07）；

SHIMSEN Styra MCX 500mg/6mL（P/N: 380-00853-10）；

SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（P/N：380-00341）；

LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet 移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

UHPLC 条件

色谱柱： Shim-pack GIST Amide（2.1×100mm，3μm；P/N：227-30818-04)

柱温： 50℃ 流速：0.4 mL/min     进样量：5 μL

流动相：A：0.2%甲酸水溶液    B：0.1%甲酸乙腈

梯度洗脱程序：

质谱条件

离子化模式：ESI，正离子扫描 扫描模式：多反应监测(MRM)

碰撞气：氩气

加热气：氮气 10 L/min

雾化气：氮气 3 L/min

干燥气：氮气 10 L/min

接口温度：300℃

DL 温度： 250 ℃

加热模块温度：400 ℃

各化合物 MRM 参数见下表(*为定量离子)

1.3.1 样品提取

称取 5 g 试样（精确到 0.01g） 于 50 mL 塑料离心管中，加入 25 mL 0.2%甲酸水溶液，手动振摇 1 min，以 10000 r/min 下离心 5 min， 用吸管吸取上清液转移至 50 mL 塑料离心管中， 混匀， 待净化。  流程图见下图。

1.3.2 样品净化

SHIMSEN Styra HLB：5 mL 甲醇、 5 mL 0.2%甲酸水溶液活化，再用 2 mL 待净化液预洗，弃去预洗液； 取 5.5 mL 待净化液上柱，以约 1 mL/min 流速通过净化柱，接收流出液于 10 mL 塑料离心管，待混合型阳离子交换固相萃取柱 SHIMSEN Styra MCX 净化。

SHIMSEN Styra MCX：依次用 5 mL 甲醇、 5 mL 水、 5 mL 30 mmol/L 盐酸溶液活化，取 5 mL 上述过柱滤液上柱，以约 1mL/min 流速通过净化柱，待样液流尽， 用 5 mL 水、 5 mL 甲醇淋洗柱，弃去淋洗液； 用 12 mL20%氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液(Tips：可换用500mg/12mL规格小柱，方便加液操作)。 将洗脱液在 50℃水浴中减压旋至 100 μL 左右， 用定容溶液（乙腈：2%甲酸水=1：1） 定容至 2 mL， 混匀。 过 0.22 μm 微孔滤膜，供 LC-MS/MS 分析。  流程图如下。

将大大米空白样品进行 0.02 mg/kg（春雷霉素、井冈霉素） 和 0.05 mg/kg（宁南霉素、多抗霉素） 加标， 按照上述前处理方法处理后上机，平行 3 份样品考察回收率和 RSD，结果显示，加标回收率为73.83%-97.13%， RSD 为 0.78%-3.51%， 回收率高，重现性好。各化合物回收率及 RSD 数据见下表：

本文建立了大米中春雷霉素、井冈霉素、宁南霉素、多抗霉素残留量的测定方法。参照 GB 23200.125-2026《植物源性食品中春雷霉素、井冈霉素、宁南霉素、多抗霉素残留量的测定》中的条件并优化，采用岛津 SHIMSEN Styra HLB、 SHIMSEN Styra MCX 产品对大米基质进行净化， Shim-pack GIST Amide 色谱柱进行分离，采用岛津液相色谱-质谱联用仪 LCMS-8050 进行检测分析。对大米空白样品进行 0.02 mg/kg（春雷霉素、井冈霉素） 和 0.05 mg/kg（宁南霉素、多抗霉素）加标，按照上述前处理方法处理后上机，平行 3 份样品考察回收率和 RSD，结果显示，加标回收率为 73.83%-97.13%， RSD 为 0.78%-3.51%，回收率高，重现性好，简单快速。该方法可为大米中春雷霉素、井冈霉素、宁南霉素、多抗霉素残留量的检测提供参考。