2026-06-01 09:48:24, Unimicro 上海通微分析技术有限公司
PEI(聚乙酰亚胺)转染试剂,属于阳离子聚合物,是生命科学实验中用于将外源DNA、RNA等核酸分子高效递送至细胞的核心工具,是目前应用较广的一种转染试剂。PEI有线性PEI和支链PEI等多种,实验中常用的为线性PEI,其中有25kDa,40kDa等。但因PEI为高分子聚合物,在生物体内不易降解,具有一定的细胞毒性,因此有必要对微量的PEI残留含量进行有效检测,
鉴于PEI本身结构的特殊性,本身不具有明显的光吸收特征官能团,因此传统的液相色谱紫外检测器无法很好的实现PEI的检测。上海通微分析技术有限公司,采用高灵敏度的通用型UNIEX-8700蒸发光散射检测器,建立了紫外吸收较弱的PEI 25kDa残留的分析方法,为转染试剂PEI残留的检测提供了有效检测方法。
EasySep®-3030液相色谱系统,配备UNIEX®-8700 ELSD 蒸发光散射检测器 |
1)ELSD检测PEI的色谱图
图1 ELSD检测PEI的色谱图
名称 | 保留时间(min) | 峰宽(min) | 峰高(mV) | 峰面积(mV*s) | 拖尾因子(EP) | 理论塔板数(EP) |
PEI | 9.658 | 0.139 | 97.551 | 513.084 | 1.08 | 75566 |
2)线性关系考察
在2μg/mL~30μg/mL浓度范围内考察PEI 25kDa的线性关系如下:PEI 25kDa在上述浓度范围内具有良好的线性关系。
3)重复性考察
图2 色谱图(6针色谱图叠加)
组分名称 | 样品名称 | 保留时间(min) | 峰面积(mV*s) |
PEI | 第1针 | 9.655 | 233.462 |
PEI | 第2针 | 9.650 | 224.913 |
PEI | 第3针 | 9.652 | 231.125 |
PEI | 第4针 | 9.660 | 229.503 |
PEI | 第5针 | 9.660 | 230.146 |
PEI | 第6针 | 9.661 | 233.150 |
PEI | AVG | 9.656 | 230.383 |
PEI | RSD(%) | 0.05 | 1.35 |
采用EasySep ®-3030液相色谱系统,配备高灵敏度UNIEX-8700蒸发光散射检测器,可以实现PEI 25kDa转染试剂残留的有效分离检测。
通微EasySep®-3030液相色谱仪(配梯度泵、自动进样器、柱温箱、UNIEX®-8700 ELSD蒸发光散射检测器) | |
UNISIL C18-ST (4.6 mm× 250 mm, 5 μm) | |
通微Unimicro ChromStation色谱工作站 |
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