Moxi库尔特细胞计数及流式细胞分析仪在PBMC检测中的应用

2026-04-27 17:21:06, 环亚生物环亚生物科技有限公司

外周血单个核细胞（Periphery blood mononuclear cell，PBMC）是外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞，单核细胞，浆细胞等（如图1）。在机体免疫系统中，PBMC细胞扮演着重要角色，不仅参与免疫应答和免疫调节，还是抗体药物研发、感染性疾病、恶性血液疾病、疫苗开发以及移植免疫等领域的研究原材料。

图1. PBMC细胞的组成

外周血中，除了PBMC外，还有无核的血小板、成熟的红细胞、多核的粒细胞等，其体积、形态和比重均不相同。因此，可用密度梯度离心法将各种细胞与PBMC分离开，如Ficoll密度梯度离心法，离心后比重较大的红细胞和粒细胞沉于管底，PBMC漂浮于分离液表面（如图2）。

图2. PBMC细胞的分离

PBMC的质量非常关键，直接决定下游的实验研究或治疗方案如何推进。但是受限于技术方法，分离出来的PBMC难以避免会混有其他细胞，如红细胞等。因此，对PBMC样本进行精确的细胞计数、精准的细胞活率检测，以确定细胞的质量尤为重要。

PBMC样本的特殊性：1.样本通常来自患者，数量有限，用尽可能少的检测次数获取到最真实的浓度数据；2.红细胞与PBMC大小相近，难以通过肉眼区分；因此常规的细胞计数方法对此类样本均无法满足要求。采用血球计数板的显微镜下人工计数方式，通常计数几十个细胞，继而推断整个样本浓度，其计数体系非常小，影响统计学准确性，同时细胞活率的判定依赖台盼蓝染色，人为主观因素导致低准确性和低重复性。基于图像法的自动细胞计数仪，通过自动化消除了一些不可靠性，但其原理与依赖图像的血球计数方式相同，仍然存在低准确性和低重复性的问题。

为解决这种复杂细胞悬液的计数问题，需要加大计数体系，即计数更多的细胞，并避免对图像的依赖。由美国Orflo Technologies 公司研发生产的Moxi库尔特细胞计数及流式细胞分析系统就是解决这一困难的利器，三个型号设备（Moxi Z，Moxi V和Moxi Go II）均采用细胞计数和细胞体积测量行业的金标准——库尔特原理，同时结合专利的微流控技术，对细胞样本进行精准细胞计数和细胞体积测量。Moxi V和Moxi Go II还增加了流式荧光检测模块，实现对细胞样本的荧光活率检测及常规流式分析。设备一次运行，可在几秒内完成数万个细胞的计数及荧光检测，计数体系大，不依赖图像，对细胞样本进行绝对计数和三维立体的体积测量，具备更高的准确性和重复性。

如图3所示，是Moxi库尔特细胞计数及流式细胞分析系统进行PBMC计数的结果，一次计数18000多个事件，包括细胞和碎片。通过设置体积门控，将<3μm处的碎片峰（红色框）排除，确保输出的浓度数据中只包括真实的细胞信息。

图3: PBMC检测结果

Moxi V和Moxi Go II在细胞计数和体积测量的基础上增加了流式荧光检测通道，预设有PBMC检测程序，实现一键调用，10秒即可完成细胞计数、体积检测及活率检测，同时可提供红细胞污染数据（图4）

图4:PBMC预设程序检测结果页面

Moxi 库尔特细胞计数及流式细胞分析产品采用库尔特原理进行细胞计数和粒径测量，其中高端型号配备流式荧光检测通道，可进行细胞活率、细胞凋亡、转染效率、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式检测。仪器设计小巧轻便，无需预热，开机即用，预设程序，触屏操控，运行后10秒即可给出测试结果，使用后也无需清洁维护。无论是经验丰富的实验高手，还是初试身手的实验小白，Moxi系统都可以助您轻松完成实验。