小核酸药物（包括siRNA、ASO等）作为继小分子和抗体药之后的第三代前沿疗法，正快速引领精准医疗的革命浪潮。长链DNA/RNA是核酸药物研发的核心支撑，广泛应用于小核酸药物本身合成、基因编辑工具（如CRISPR-Cas9向导RNA）、病毒递送载体构建，同时在靶点验证、候选药筛选及规模化生产中不可或缺，其质量直接决定研发效率与产品安全性，凸显了合成长链序列的必要性，然而，其研发与规模化生产的核心瓶颈之一，在于如何高效、经济地获取高质量的长链DNA原料。这一合成技术是制备基因编辑工具、病毒载体及核酸药物本身的起点，其通量、长度与成本直接决定了候选药物的筛选速度与最终疗法的可及性。合成长链序列的挑战主要源于三方面：一是工艺上，长链合成需多步串联反应，偶联、脱保护效率的累积误差会降低产物纯度，链越长，杂质（缺失碱基、错配序列）越多，纯化难度呈指数级上升；二是序列组成上，高GC含量、重复序列或特殊修饰碱基易形成稳定二级结构，阻碍合成并增加纯化难度；三是设备稳定性上，长链合成对设备精度和反应环境控制要求极高，温度、湿度等微小波动会导致产物批次差异，难以满足规模化生产的一致性要求。

据权威市场分析报告预测，全球小核酸药物市场正以超过30%的年复合增长率高速扩张，预计到2030年，市场规模将突破250亿美元。这一广阔前景，对上游关键原料与工艺提出了前所未有的需求与挑战。

在此这一背景下，英赛斯核酸合成仪平台通过持续优化自动化合成循环，在确保高精度与高纯度的同时，不断突破单通道核酸合成仪在合成长度与规模效益上的极限。凭借它以出色的稳定性和可放大性，构建起从小试探索到商业化生产的坚实桥梁，为小核酸药物的产业化进程之路提供了不可或缺的规模化支撑基础。

合成序列：

ATCC.........CCCC（80nt）

MW:24700 g/mol

合成工艺简述

本工艺采用 NestoOligo 100核酸合成仪进行核酸合成，以CPG为固相载体，单体投料量控制在4~8当量，单步反应时间为10~15分钟。相较于常规高通量核酸合成仪（如192通道、12通道）的长链合成工艺，传统方案通常需使用8当量以上、甚至高达20倍的单体投料，才能趋近目标纯度，但实际产物纯度仍不理想，单步耦合效率普遍仅为0.99，且存在通量偏低、难以满足大规模需求等痛点。本工艺以解决上述问题为核心优化目标，在单体投料比与合成规模两方面均实现关键提升，综合性能优于市面常规工艺。

NestoOligo 100核酸合成仪

合成过程中的合成效率、UV、电导、压力等参数实时监控

序列合成全程监控

合成效率监控

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NestoOligo 100 上80nt的合成粗品结果：

经色谱质谱分析，得到合成粗品纯度为64.56%，单步碱基的偶联效率可达99.4%，质谱正确。

Hicient L-2000Bio高效液相色谱仪

HPLC图谱（英赛斯）

MS图谱（分子量正确）

此案例采用使用英赛斯NestoOligo 100核酸合成仪完成，合成粗品纯度优异。充分展示显示了该NestoOligo 100系统优秀的合成效率和运行稳定性。

英赛斯小核酸整体解决方案