2026-03-09 09:45:53, 飞飞 赛默飞色谱与质谱分析
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棉花作为全球最重要的经济作物之一,其产量主要取决于棉纤维早期发育过程。传统代谢分析因匀浆处理损失了代谢物的空间信息,致使棉纤维早期发育过程的时空代谢特征不够明确,成为限制棉花育种突破的关键瓶颈。质谱成像(MSI)驱动的空间代谢组学技术,可原位捕获数千种代谢物分子的空间分布,同时进一步结合其他组学技术形成“时空多组学”分析策略,该策略能够系统揭示棉纤维早期发育的调控机制,有望为棉花育种改良提供新的突破口。
2025年1月20日,河南大学孙旭武教授团队在《Nature Communications》上发表了题为“Spatiotemporal transcriptome and metabolome landscapes of cotton fiber during initiation and early development”的研究论文。该研究采用新兴的“时空多组学”分析策略,通过结合空间代谢组学(基于AFADESI-Orbitrap质谱成像技术)、空间转录组学与单细胞转录组学,系统揭示了棉纤维分化起始阶段(开花前1.5天至开花后2天)与早期伸长阶段(开花后3-5天)的基因代谢物调控网络,进而精确锁定用于育种改良的关键靶点。该研究为解析棉花及其他植物发育过程调控机制提供新的方法范式。
图1 研究框架(点击查看大图)
质谱成像解锁棉花纤维发育的代谢密码
AFADESI-Orbitrap实现高灵敏、广覆盖质谱成像
研究采用AFADESI-Orbitrap质谱成像技术对不同发育阶段的棉铃整体切片(开花前1.5天至开花后5天,DPA)进行空间代谢组学分析,成功捕获了数千种代谢物分子(涵盖有机酸、氨基酸、多胺、碳水化合物、胆碱、核苷酸、核苷、倍半萜类、苯类化合物、脂肪酸及各类磷脂等)的空间分布信息。筛选差异代谢物发现脂肪酸、胺类、氨基酸及肽类等在胚珠中特异表达。进一步分析胚珠中代谢物积累动态发现十二烷二酸、亚油酸、精胺等浓度从-1.5DPA到5DPA逐渐降低,提示与棉纤维“起始”阶段密切相关,而α-亚麻酸、组氨酸和油酸等则浓度逐渐升高,提示与棉纤维“伸长”阶段密切相关。该研究证实AFADESI-Orbitrap质谱成像技术具有高灵敏、广覆盖的独特优势,同时也凸显了其在解析植物发育过程中时空代谢动态的卓越能力。
图2 棉铃胚珠中-1.5DPA-5DPA的关键代谢物成像数据
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以质谱成像代谢图谱为锚点整合时空多组学
本研究创新整合了空间代谢组学、空间转录组学与单细胞转录组学,构建了 “时空多组学”分析框架。其核心在于以 AFADESI-Orbitrap质谱成像技术绘制的空间代谢图谱为锚点,通过多组学空间对齐,实现关键基因与代谢物的精准关联与可视化。例如,α-亚麻酸在伸长阶段的显著积累与代谢酶基因 DOX2 的高表达呈现高度空间共定位,直接锁定该阶段调控关键靶点,完成 “多组学发现→靶点锁定→功能验证” 的完整闭环。研究证实以AFADESI-Orbitrap代谢图谱为锚点驱动的时空多组学整合是解析植物发育调控的强大范式。
图3 α-亚麻酸代谢途径及代谢酶相关基因的综合分析
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质谱成像绘制棉花体细胞胚胎发生过程时空代谢图谱
棉花体细胞胚胎发生(SE)过程复杂、耗时且严重依赖棉花品种,一直是制约棉花体外再生研究的关键问题,中国农业科学院棉花研究所李付广研究团队及河南大学孙旭武研究团队运用同样的“时空多组学”策略对此展开研究,该文章与上文同一时间发表在《Nature Communications》期刊(DOI:10.1038/s41467-025-55870-6)。
研究基于AFADESI-Orbitrap质谱成像技术,精准绘制了SE过程中愈伤组织、球形胚、鱼雷胚与子叶胚四个关键阶段的时空代谢图谱:愈伤组织阶段L-组氨酸、L-缬氨酸显著富集;球形胚中精胺、亚精胺显著富集;鱼雷胚中芥子碱等苯丙素类物质富集;子叶胚中则富集N-氨基甲酰腐胺等物质,其皮层组织中富集亚油酸等。研究以代谢图谱作为空间锚点整合多组学数据,揭示了SE过程中基因-代谢物调控网络,并锁定了关键调控因子,为突破棉花体细胞胚胎发生的品种依赖性和效率瓶颈提供了全新的解决方案。
图4 棉花体细胞胚胎发育过程中代谢物的空间分布
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AFADESI-Orbitrap助力作物育种新突破
AFADESI-Orbitrap质谱成像技术具备高灵敏、广覆盖的独特优势,既能精准绘制时空代谢图谱,同时其图谱可作为整合多组学数据的关键空间“锚点”,是构建“时空多组学”分析框架的核心。该策略已成功应用于棉花“纤维发育”及“体胚发生”等重要育种方向,验证了该技术作为一套高效、可复用解决方案的可靠性,为作物育种研究提供了坚实的技术支撑与创新的方法范式。
AFADESI-Orbitrap 质谱成像技术凭借其高灵敏、广覆盖的独特优势为植物代谢研究提供强大技术支撑,其应用涵盖作物发育调控机制研究、中药材代谢调控研究、药用植物次生代谢研究。
AFADESI可搭载赛默飞Orbitrap超高分辨质谱全平台
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