色谱实验必备:一份缓冲盐选用指南

2026-01-26 13:24:21, 技尔 GL Sciences 技尔(上海)商贸有限公司




流动相pH的

控场大师

   缓冲盐的 

  选择要点  

如何选择合适的缓冲盐? 


当您的色谱峰突然拖尾如蜗牛,保留时间玩起漂移——这或许是流动相里那位pH “控场大师”缓冲盐在搞事。选对它是分离利器,选错秒变堵柱刺客。文带您化身“选盐达人”,为您的方法开发送出关键一环!




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什么是缓冲盐


缓冲盐是指对pH有缓冲能力的盐,其在一定范围内可抵抗外来酸或碱对溶液pH值的影响,从而维持溶液pH值相对稳定。






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缓冲盐的作用

在液相色谱反相方法中,缓冲盐水溶液的正确使用有调节保留改善峰形调控选择性等作用。

   缓冲盐稳定流动相pH一般是为了抑制目标物质解离,所以在了解目标物的pKa情况下选择合适的缓冲盐来调节流动相pH。

酸性化合物

①如对于酸性化合物,应选择低 pH 缓冲液流动相。缓冲范围应在其缓冲液离子 pKa 值士1pH 单位,这样流动相的优化可以有一定的灵活性。例如,醋酸盐的 pKa为 4.8,缓冲范围为 pH3.8-5.8。

碱性化合物

②对于碱性化合物,为得到其非离子形态,应选择高 pH 条件,此时需选择耐碱色谱柱。但是一般多数碱性化合物在低 pH 条件下的保留已经能够满足要求,综合考虑,具体情况下也可选择低pH条件。



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如何选择

合适的缓冲盐

我们可以通过水里加酸、碱、盐,来调节流动相pH值。液相色谱时低波长下选磷酸较合适;液质联用时可选三氟乙酸,或甲酸、乙酸。初步建立方法时流动相可选0.1%的磷酸水溶液,然后在此基础上再做优化。如果单独用酸效果不好时可考虑使用缓冲盐,缓冲盐的选择原则是:简单、稳定、缓冲能力强、配制简单,在调pH值时要用相对应的酸或碱。常用的缓冲盐一般是磷酸盐,还有醋酸盐,常用的盐浓度在10-20mM左右(一般不应超过50mM)。


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各种缓冲盐

缓冲区间



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