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2026-05-08 10:52:12, 技尔 GL Sciences 技尔(上海)商贸有限公司


离子对试剂使用指南

附酸性高极性物质

分析新方法


液相反相方法开发中,有时会用到离子对试剂,以提高对离子化合物的保留。

如上图所示,流动相中添加离子对主要是可以产生与目标物质电荷相反的离子。这种离子与目标离子结合形成疏水型离子对化合物,从而使目标物在色谱柱上有更好的保留效果来实现分离。

所以,我们可以得出以下结论 ↓

对于带正电的目标物

需要使用带负电的离子对试剂,如烷基磺酸盐

对于带负电的目标物

需要使用带正电的试剂,如四丁基铵盐




离子对试剂的使用需要注意哪些事项


01

流动相的pH


目标物的pKa和流动相的pH会影响目标物的电离状态,根据已知目标物的pKa,应调整流动相的pH使目标物处于电离状态。如某酸性目标物pKa为3.0,则流动相pH可调整为5.0以上,让离子对试剂可充分与目标物结合。



02

离子对的疏水性


长链离子对试剂可增强保留但也会影响峰形;短链离子对试剂保留稍弱但峰形更佳。例如十二烷基磺酸钠比庚烷磺酸钠的疏水性强,可能保留时间更长。一般需优先选用碳链短的离子对试剂,这样也可以有效减弱离子对试剂强保留对色谱柱产生的不利影响。



03

离子对的浓度


建议在5-20mM之间,浓度太低可能无法形成有效离子对,浓度太高可能导致溶解问题及干扰检测器,高浓度离子对也会加速柱子的劣化。另外还需注意长链离子对试剂在乙腈中溶解度较低



04

离子对与检测器的匹配性


用在质谱方法的离子对试剂需要有较好挥发性,比如七氟丁酸(HFBA)或三氟乙酸(TFA),而常规的紫外检测器可以使用非挥发性的试剂,如十二烷基磺酸钠,但需考虑其紫外吸收是否会影响基线。



Q

那么,如果分析酸性高极性物质不想使用离子对怎么办?

别担心,GL Sciences混合模式色谱柱InertSustain AX-C18为带负电的高极性酸性物质分析提供了新的解决方案!

该色谱柱硅胶基体键合有两种官能团:C18和叔胺基团。这两种官能团使该色谱柱具有反相+阴离子交换双重作用力,同时该款色谱柱也可应用于100%水相分析条件,能够很好地保留有机酸、核苷酸等酸性、高极性化合物。

A


InertSustain AX-C18

产品特点



键合C18+叔胺基团,反相+阴离子交换双重作用力

增强酸性、极性化合物保留

高耐久、低背压、高批次重现性

糖核苷酸分析案例


色谱条件

色谱柱: InertSustain AX-C18

(3μm,150×2.1mm I.D. Cat.No:5020-91039)

流动相: 20mM醋酸铵溶液

流速: 0.2mL/min

柱温: 40℃

检测器: UV 254nm

样品: 1.UDP-Glu 2. UDP-Gal 3.GDP-Man

    如您有此类项目分析需求,或期望替代反相+阴离子交换离子对方法,欢迎试用我司色谱柱产品!



    为了更好地支持您的研发与检测工作,技尔上海推出的先行试用色谱柱产品,不仅涵盖液相色谱柱、气相色谱柱等多种类型,更适用于制药、食品、环境、化工等多个领域,助您“赢”战实验难题。





关于技尔上海

技尔(上海)商贸有限公司是由日本色谱耗材、分析仪器生产厂商GL Sciences在中国设立的全资子公司。我们秉承“以用户需求为先”的理念,将GL Sciences在色谱行业积累的经验与不断发展的进步科技相结合,为中国色谱行业用户提供解决方案与服务,让您的色谱分析工作更便捷。

GL Sciences扎根分析领域五十余年,旗下产品用于环境、医药、材料、食品、化工、生命科学等多个领域,可为客户提供分析中所需的仪器及耗材。


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