药典方案集锦 | 按典索骥-聚维酮系列二：2-吡咯烷酮方法深度解析

2025-09-09 15:05:14, 安捷伦科技安捷伦科技（中国）有限公司

精彩回顾

上期分享我们深度探讨了聚维酮中杂质 N-乙烯-2-吡咯烷酮的解决方案，了解到 2025 版《中国药典》、USP、EP 中 N-乙烯-2-吡咯烷酮分析方法完全一致，而 USP、EP 方法中最大的特点是通过阀切换对样品进行在线预处理，从而实现样品在线净化。

本期我们将继续以 2025 版《中国药典》更新的质量标准为基础，同时参考 USP 和 EP 标准方法，探讨聚维酮中另一液相检查项 2-吡咯烷酮解决方案。

各国药典标准对比

对比各国药典中 2-吡咯烷酮检测方法，我们发现 USP 和 EP 的色谱条件完全一致，并且均采用在线自动阀切换方案反冲预柱（Online SPE）；相比之下，中国药典色谱条件差异较大：未提及预柱反冲方案，其流动相组成、系统适应性要求略有不同，对照液浓度、进样体积等条件不同。

中国药典、USP 和 EP 具体方法对比如下：

方案一：参照 25 版《中国药典》方法，设置如下液相分析方法：

分析系统：

G7111B	1260 Infinity III 四元泵
G7167A	1260 Infinity III Multisampler
G7116A	1260 Infinity III 高容量柱温箱
G7117C	1260 Infinity III 二极管阵列检测器 HS

色谱条件：

色谱柱	Agilent XDB C18 （150 mm×4.6 mm，5 μm，P/N.993967-902）
流动相	乙腈:甲醇:水=5:5:90
进样量	20 μL
流速	1.0 ml/min
柱温	40 ℃
DAD	205 nm

在此条件下，运行 2-吡咯烷酮对照溶液和聚维酮样品溶液，结果如下：对照溶液 2-吡咯烷酮（2-VP）连续运行 6 针，峰面积 RSD% 为 0.08%，符合药典 2.0% 以内的限度要求；对照系列溶液在（10.06-120.60）μg/mL 浓度范围内线性良好（r>0.9999）。

图 1. 2-吡咯烷酮对照溶液色谱图和精密度结果

图 2. 2-吡咯烷酮线性溶液色谱图和标准曲线（r=0.99991）

图 3. 2025 版药典聚维酮样品溶液色谱图

综合上述数据得出：按照 25 版中国药典方法测试聚维酮样品，可有效分析杂质 2-吡咯烷酮。

在 USP、EP 收载的标准方法中，2-吡咯烷酮采用 OnlineSPE 功能，先将主成分聚维酮保留在预柱中，通过阀切换，实现分析柱测试样品中杂质组分，主成分聚维酮被流动相反冲至废液，有效保护了色谱柱。

方案二：USP、EP OnlineSPE 色谱方法：

分析系统：

G7111B	1260 Infinity III 四元泵
G7167A	1260 Infinity III Multisampler
G7116A	1260 Infinity III 高容量柱温箱
G7117C	1260 Infinity III 二极管阵列检测器 HS

清洗系统：

G7111A	1260 Infinity III 四元泵 VL
G7117C	1260 Infinity III 二极管阵列检测器 HS

色谱条件：

色谱柱	OnlineSPE 小柱：XDB-C18，4.6x12.5 mm (柱芯 P/N.820950-925，卡套 P/N.820999-901) 分析柱：ValueLab LC GP-C18，4.6x150 mm，3.0 μm；(P/N.583973-618)
阀切时间	0min:1-6 号位；2min:1-2 号位
流动相	甲醇:水=5:95
进样量	50 μL
流速	1.0 ml/min
柱温	40 ℃
DAD	205 nm

图 4. 阀切换示意图（切阀时间：2 分钟）

在 USP、EP 方法条件下，运行 2-吡咯烷酮对照溶液和聚维酮样品溶液，结果如下：2-吡咯烷酮（2-VP）对照液连续运行 6 针，其峰面积和保留时间的精密度均在 0.2% 以内，峰拖尾因子 1.4，符合药典要求。

图 5. 对照溶液色谱图和精密度结果

图 6. OnlineSPE 法聚维酮样品溶液色谱图

按照 USP、EP 标准方法测试聚维酮样品（不切阀），在 2-吡咯烷酮杂质出峰后，流动相设置为梯度洗脱，如下图色谱图所示，在高比例有机相条件下，可将吸附在色谱柱中的主成分洗脱出来，由此证明：在当前药典条件下，没有 OnlineSPE 样品在线处理时，色谱柱中吸附了高浓度的低极性组分，长此以往使用，将会严重损害色谱柱寿命。

图 7. 聚维酮样品色谱图

以聚维酮样品 K25 为例，采用 USP、EP 不切阀方案和 OnlineSPE 方案对比研究发现：相同样品，两种方案所得杂质峰面积一致，证明 OnlineSPE 方案对杂质分析无损失，结果真实可靠；同时，采用在线自动阀切换方案对样品进行 OnlineSPE 处理，去除不需要的主成分至废液，保留杂质组分进行分析测试，真正达到了降低液相分析系统和色谱柱损耗的效果。

结语

采用《中国药典》收载方法，搭配 Agilent XDB-C18 色谱柱，对聚维酮中杂质 2-吡咯烷酮进行测试，结果符合药典规定。

USP、EP 中的 OnlineSPE 联合分析测试方案，可将预柱中聚维酮组分反冲至废液。该方案在不改变药典既定方法的基础上，增加 OnlineSPE 样品处理步骤，其分析方法和药典要求完全一致。OnlineSPE 方案的优势在于，既能保护液相分析系统免受污染，又能精准重现药典方法的分析结果，真正实现了净化系统和有“法”可依的双赢效果。

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